生物化学中心法则的概念.doc

第十章 一、中心法则的概念 见右下图示。 / \ 转录 复制 DNA RNA 翻译 ——-蛋白质 逆輪录 二、复制的基本规律 W复制的半保留规律要点 ?亲代的Df\A分子是双螺旋结构，碱基对之间按照互补原则严格配对A二T、G三C ?复制时,双链解开生成的两条单链,分别作为模板，按照碱基互补原则合成新的单链。 ?新合成的子代DI\A分子中,其中一条链来自于亲代DI\A ,另一条是新合成。 ?两个子代的Dfg都和亲代Dfg碱基序列一致。 原核与真核DhA复制的特点 见表10-10 表10?1原核与真核复制的特点 原核生物 真核生物 复制起点 —个 多个 复制方向 双向 双向, 电镜图 眼睛状 不清 复制子 单个，又称为复制体 多个 三、DI\A复制时的酶学知识（各种酶的功能） 复制的化学反应 ? 复制的反应式：（dNW） “ + dNFP t （dNW）由 + PPi ?新链的延长方向：只可沿3 方向进行。 原核生物的Z聚合酶 原核生物DI3聚合酶的特点见表10-2O 表102原核生物DhA聚合酶的特点 DTA-pol I DN^pol II 恥pol III 3 聚合酶活 性 + + + 5’ -3^外切酶活 性 + - - 3r 外切酶活 性 + + + 基因突变后的致死 性 + - + 主要功能 复制过程校读、修 复、填补缺口 在无 pol I、III 时起聚合作用 延长新核昔酸 链的聚合作用  真核生物DTS聚合酶的特点 见表10-3O 表10?3真核生物DhA聚合酶的特点 DTA-pol a DhA-pol P DTA-pol Y DN^polS DbA- pol E 5 聚合酶活 性 + + + + + 5 T；外切酶活 性 + + + + + ；T5外切酶活 性 ■ - + + + 主要功能 引物酶活 性,起始 引发 低保真 度的复 制 线粒体 DN^的 复制中 主要催化作用, 相当于原核生物 聚合酶III,有 解螺旋酶活性, 延长子链的主要 爾 作用是校 对、修复和 填补空隙， 相当于原核 生物的聚合 酶I 复制的保直性 ?具看? 外切酶活性的酶是复制保真性的基础，原核生物主要是DhApol I,真 核生物主要是DN^polE o ? 错配出现的频率：ddA dA/dA dC/dA ?复制保真性依赖的三种机制 /遵守严格的碱基配对规律。 /聚合酶在复制中对碱基的选择作用。 /复制错误时有即时的校读功能。 原核生物复制起始的相关蛋白质 见表10?4。 表10?4原核生物复制起始的相关蛋白质 起始时的相关蛋白 质 通用名 蛋白质功能 DnaA - 辨认起始点 DnaB 解螺旋酶 解开DhA双链 DnaC - 运送和协同OiaB蛋 白 DnaG 引物酶 催化R2引物的合成 SSB 单链Z结合蛋白 稳定已解开的单链 拓扑异构酶 - 理顺Z链 DTS拓扑异构酶的比较 见表10-5O 表10?5 Df\A拓扑异构酶的比较 拓扑异构酶I 拓扑异构酶II 曾用 名 原核 3 -蛋白 旋转酶 真核 转轴酶、解缠酶、切 口封闭酶、松弛酶 分为好几种亚型 功能 切断DI3双链中的一 股 切断正超螺旋的 W分子双链，松弛 超螺旋 连接断端，使松 弛状恢复负超螺 旋状 是否需要 ATP - — + DhA连接酶 记忆要点： ?连接Z链3?CH末端和5’?P末端，生成磷酸二酯键。 ? 催仃羹尋消蘇zn-p ?只能连接碱基互不【基础上的双链中的单链缺口。 ?不能连接单独存在的 W单链或RhA单链。 ?在复制中最后连接缺口，在DI3修复、重组、剪接中也起缝合缺口作用。 ?是基因工程中重要的工具酶。 五种酶催化磷酸二酯键的生成 见表10?6O 表10?6五种催化磷酸二酯键生成的酶 提供核糖的3’ -CH 提供5’?P 反应结果 DI3聚合酶 引物或延长中的新链 游离dNTP去PPi (dNTP) RhA聚合酶 单个的NTP或延长中的新 链 游离NTP去PPi (NTP)⑷ 逆转录酶 单个的dNTP或延长中的 新链 游离dNTP去PPi (dNTP)⑷ DTS连接酶 复制中不连续的两条单链 不连续T连续 DN^拓扑异构 酶 切断整理后的双链 改变拓扑状态 四、DhA生物合成过程，原核与真核生物的比较 原核生物的N生物合成 ?复制的起始 / DhA解成复制叉 DnaA （辨认起始点 DnaB （解螺旋酶 DnaC （协同B蛋白）三种蛋白和SSB 参与。 /引发体的形成 引发体：解螺旋酶、DnaC蛋白、弓I物酶（DnaG蛋白）和DhA起始复制区域的复 合结构。 /引物合成 记忆要点： ⑴引物是由引物酶催化合成的短链Rl、4分子。 ⑵引物酶就是BaG蛋白。 ⑶引物合成的方向也是3 -3#方向进行。 ?复制的延长 / 延长的反应式：（dN\f ） n