沟叶结缕草体细胞无性系变异研究园林植物与观赏园艺专业论文.docxVIP

摘 要沟 摘 要 沟 叶 结 缕 草 (子岁￡ia m a tre lla (L . ) M err. ) 又 名 马 尼 拉 ， 是 一 种 优 良的 暖 季 型 草 坪 草 ，被 广 泛 应 用 于 高 尔 夫 球 场 、田径 场 和 公 园 ，成 为 我 国南 方 大 部 分 地 区 的主 要 草 坪 草 种 。沟 叶 结缕 草 在 自然 界 中通 过 葡 旬 茎 无 性 繁 殖 ，因此 不 能用 杂 交 育 种 等 传 统 方 法 对 其 进 行 遗 传 改 良，而 通 过 体 细 胞 无 性 系 变 异 等 生物 技 术 提 高 其 抗 逆 性 是 一 种 有 效 的 途 径 。 本 试 验 以沟 叶 结 缕 草 甸 旬 茎 诱 导 的胚 性 愈 伤 组 织 为 材 料 ，比较 了不 同培 养 类 型 (悬 浮 培 养 和 固 体 培 养 )，不 同基 本 培 养 基 (MS 、N 6 、N 6从 ) 和 2 ，·4一D 浓 度 (l .0 、 2 .0 、3 .0 、4 .0 、5 .0 m g ·L一‘)，不 同蔗 糖 浓 度 ( 1.0 % 、2 .0 % 、3 .0 % 、4 .0 % 、 5 .0 % )，不 同细 胞 分 裂 素 种 类 ( 空 白对 照 、BA 、KT 、ZT 、T D Z) ，不 同培 养 温 度 (4 ℃ 和 2 5 ℃ )，不 同 继 代 培 养 时 间 (l 年 和 5 年 )，不 同辐 射 剂 量 (0 、5 、 10 、20 、 40 G y ) 的 60C o Y 射 线 对 愈 伤 组 织 生 长 、 再 生 以及 生 理 、 遗 传 稳 定 性 的 影 响 ， 并 对 愈 伤 组 织 进 行 了不 同浓 度 的 N aC I (0 % 、 1.0 % 、 1. 5 % 、 2 .0 % ) 筛 选 和 草 甘 麟 (0 、 0 .0 1 、0 .0 2 、 0 .05 、0 . 1 、0 .5 、 1.0 、 1.5 、 2 .0 nun o l ·L一，) 筛 选 。 主 要 研 究 结 果 如 下 : 1. 同 固体 培 养 相 比 ，悬 浮 培 养 能 显 著 提 高 愈 伤 组 织 的 生 长 速 度 ，但 是 长 期 悬 浮 培 养 会 降 低 愈 伤 组 织 的 再 生 能 力 ，因 此 较 适 合 愈 伤 组 织 短 期 快 速 增 殖 。沟 叶 结 缕 草 胚 性 愈 伤 组 织 继 代 培 养 适 宜 的 基 本 培 养 基 为 MS 培 养 基 ， 添 加 2 .O mg ·L 一， 2，4一D 、 40 9 ·L一‘蔗 糖 能 使 愈 伤 组 织 长 期 保 持 旺 盛 的 生 长 、 良好 的胚 性 和 较 高 的 再 生 能 力 。BA 较 适 合 用 于 愈 伤 组 织 再 生 。在 添 加 0 . l mg ·L一‘BA 的 再 生 培 养 基 上 ， 愈 伤 组 织 能 分 化 出 较 多 生 根 良好 的 小 苗 ，有 利 于 移 栽 后 的 成 活 及 再 生 植 株 C AT 活 性 的 提 高 。 2 . 经 过 n 个 月 的 4 ℃ 低 温 保 存 后 ， 具 有 再 生 能 力 的 愈 伤 组 织 比 率 保 持 在 91 . 7 % 一9 7 .9 % ，但 再 生 速 度 显 著 下 降 ，再 生 所 需 要 的 时 间 增 加 。 当 愈 伤 组 织 在 4 ℃ 条 件 下 保 存 13 个 月 后 ， 再 生 能 力 显 著 下 降 。 愈 伤 组 织 经 过 5 年 的 继 代 培 养 后 ， 再 生 率 同 l 年 相 比 没 有 显 著 差 异 。 3 . 较 低 的 辐 射 剂 量 (5 G y ) 对 愈 伤 组 织 的 生 长 、 再 生 没 有 显 著 影 响 ; 中 度 辐 射 剂 量 ( 10 G y 、 20 G y ) 能 提 高 愈 伤 组 织 的 再 生 速 度 ; 较 高 的 辐 射 剂 量 (40 G y ) 使 愈 伤 组 织 的 胚 性 保 持 能 力 和 再 生 率 有 所 下 降 。 与 对 照 (0 G y ) 相 比 ，辐 射 处 理 (5 (5 G y 、 10 G y 、20 G y 和 40 G y ) 能 显 著 提 高 再 生 植 株 叶 片 内 的脯 氨 酸 含 量 ， 最 高 可 达 对 照 (0 G y ) 的 2 .4 倍 (2 0 G y )。 4 . 10 G y 6℃。Y 射 线 辐 射 处 理 使 再 生 植 株 的 CAT 活 性 和 脯 氨 酸 含 量 分 别 提 高 16 .0