不同品种和不同茬口大豆根面及根际的微生物群落结构分析植物营养学专业论文.docxVIP

摘要在控制条干q二F，采用平板稀群法、直接计数法和16S 摘要 在控制条干q二F，采用平板稀群法、直接计数法和16S rDNA—DGGE相结合的方法，检测r 不同抗病品种大豆根面及根际微生物群落结构的差异，包括抗大豆根腐病(SRR)的绥农10 (S10)、抗胞囊线虫病(SCN)的抗线2号(K2)以及易感SRR利SCN的合牟25 (H25)。结果表明，三个品种人豆从三叶期到鼓粒初期，根面币I根际的可培养细菌总数均随生 育期逐渐增加，鼓粒初期达最大值，而成熟期则有明显的下降；大豆根际细菌生物量也存在相 同的变化规律，这种变化趋势与前人报道的根分泌物随生育划的变化规律相似：S10刊K2人豆 的根瘤重明显高丁H25；剑成熟期H25根际积累的病原生物(镰孢霉Fusarium sp．和{人豆胞囊 线虫Heterodera glycines的胞囊数)也明显高于S10和K2。通过16S rDNA—DGGE分析表明， 不同品种或是不同生育划人豆根面细菌种群均存在差异，而且不可培养细菌在根面Ill有绝对的 优势。上述结果表明人豆根系分泌物对微生物具有选择性的促进或抑制作用，可能由T‘不同品 种和不同生育期人豆根系分泌物的组成和数量不同，从而使大豆根面及根际形成了特定的微生 物群落结构。 采，I!}j除去了残茬的迮作十壤为供试土壤，检测了抗感SRR的两个品种(S10利tt25)人豆 根分泌物对根面和根际微生物区系的影响。结果表明H25根瘤重明显低于S10；两个晶种人豆 连作后均造成根面、根际真菌种类单一化，根面细菌数量减少和病原菌(镶孢霉)数量积絮， 表明根系分泌物对根面和根际微生物有更进一步的选择作用。 在田间长期定位试验(微区雨I小区)条什下，采用平板稀释法年¨16S rDNA—DGGE检测了 不同茬口(正茬、迎荐年¨不同连作年限的连作大豆)大豆之间根面及根际微生物群落结构构差 异。结果表明，正茬火豆生艮状况、干物质积累和外观品质均好于迎荐和连作人豆。但人豆生 长状况并非随着连作年限的增加而变差，短期连作(连作4～5年以内)随着连作年限增加，大 豆的生睦越来越差，而近作6年以上人豆的生长状况又有所改善。_十-壤中SCN的胞囊量随着连 作年限增加也有一个“白然衰退”的现象。在微区试验中，连作和迎茬火豆苗划根而弃¨根际镰 孢霉数量均多于正荐人豆，正茬人豆根瘤重均高于连作。在小区试验中，正荐人豆花期根面细 菌的多样性(Ⅳ)高于迎茬，迎茬高于连作，短期连作使根面细菌的抒降低，造作6年达到最 低，而后又稍有增加。总之，火豆生长状况和干物质积累状况的变化规律与根面、根际镰孢霉 和土壤中SCN的胞囊数量的增加、根瘤重以及根面细菌H的减少规律具有一定的相关’肚，可以 推断根面、根际镰孢霉和土壤中胞囊数量的增加、根瘤重和细菌多样性(H)的减少均可能为导 致连作障碍的主要冈素。 关键词：人豆连作，根面，根际，微生物，16S rDNA，变性梯度凝胶『U泳(DGGE) AbstractMicrobial Abstract Microbial comrnunities in the rhizoplane，rhizosphere and bulk soil were investigated with three soybean cultivars，including resistant cultivar(Kangxian 2，K2)to the soybean cyst nematode (SCN)，a resistant cultivar(Suinong 10，S10)tothe soybean root rot(SRR)，and susceptible cultivar(Hefeng 25．H25)to both SCN and SRR under the controlled conditions by plate counting， direct counting，and molecnle-based method，16S rDNA-PCR followed by denaturing gradient gel electrophoresis(DGGE)．Tile total amount of colony forming units(CFU)of bacteria in the rhizoplane and rhizospbere increased gradually with time from trifoliate stage to early filling stage，but decreased dramatically at mature stage afar its reaching a peak at the early filli