肌酸激酶测定SOPCK临床意义.docVIP

1检测原理 CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺昔二磷酸(ADP)的转磷酸过程，产生腺昔三磷酸(ATP) o这种方式 形成的ATP用于在己糖激酶(HK)催化的反应中使葡萄糖磷酸化，生成的葡萄糠-6-磷酸盐由葡萄糖 -6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化,同时还原磷酸烟碱腺嚓吟二核昔酸(NADP)。形成的NADPH引起的 在340 nm处发生的吸光度变化，与CK活性直接成比例，因为其他反应物以不限制比率的数量存在, 可以使用双波长(340, 405 nm)技术来测量。 磷酸肌酸+ ADP CK 肌酸+ ATP ? Mg++, DTE, EDTA ATP +葡萄糖 HK ADP +葡萄糖-6-磷酸盐 A Mg++ 葡萄糖-6-磷酸盐+ NADPf G-6-PDH - 6-磷酸葡萄糖内酯+ NADPH + (H) ? 2标本采集与处理 1采血方法 空腹采不抗凝静脉血2?3ml。 2.2标本保存 采集后应及时送检。如杲不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，避光置冰箱保存。室温 4h、4°C8?12h、冰冻3?4天能维持活性不变。 3注意事项 推荐选用血清。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黄疸。 3试剂和设备 1试剂 采用酋门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船广6孔为己糖激酶4500 U/L, G-6-PDH 2800 U/L, ADP 1.88 Mm,磷酸肌酸18. 1 mM,葡萄 糖11.65 mM, NADP 2. 88 n)M,缓冲液,AK抑制物,激活剂物,片剂。 1.2试剂准备 直接使用。 1.3试剂保存 试剂2-8°C保存，有效期内稳定。 3.2质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 4.1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 4.2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500?3000r/min,离心6?l（）min,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8°C保存。 4.4标本检测 4. 1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode （按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。 4. 2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 样品检测。 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按口期放好，保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 直接使用，2?8°C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5:PROCESS CTRL-Fl: CALIBRATION,按 enter-*F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选屮相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4： ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架上 按F7： LOAD/RUN-F4： RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10??70°C可保存到瓶身有效期，未开启2?C可保 存90山开启后2?VC可保存30d o 6.2质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。 3质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7性能参数 木法线性范围为0?800U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标木进行稀释，输入稀 释因子后再重新检测。 8生物参考区间 男性：35?232U/L 女性：21?215U/L 9临床意