肌钙蛋白I测定SOPCTNI临床意义.docVIP

页码：第页共页 1检测原理 CTNI方法是基于双抗体夹心原理的一步法酶免疫测定。样本与用心肌肌钙蛋白7分子的特异单克 隆抗体包被的二氧化珞颗粒，和标记了心肌肌钙蛋白-1的特异单克隆抗体的结合试剂［碱性磷酸酶 （ALP）］共同孵育，形成颗粒/心肌肌钙蛋白1/结合夹心。自由觇合物可通过磁性分离和清洗来清除。 分离和清洗之后，颗粒/心肌肌钙蛋白-1/结合剂夹心转移到比色杯中，在那里，夹心结合的碱性磷 酸酶触发扩增反应。使人造黄素腺嘿吟二核背酸磷酸（FADP）脱去磷酸，生成黄素腺嚓吟二核昔酸 （FAD） o结合到apo D-氨基酸氧化酶（脱辅基的）并将其转换为活化的全D-氨基酸氧化酶。然后每个 全D-氨基酸氧化酶分子生成多个分子过氧化氢（H202），后者在有辣根过氧化物酶（HRP）的条件下, 将3, 5-二氯-2-疑苯璜酸（DCHBS）和4-氨基安替比林（4-AAP）转换为在510 nm处吸光的有色产 品。测定的颜色变化与患者样本中存在的心肌肌钙蛋白-1浓度成正比。 cTnl + CrO2-Ab + Fab -ALP ? CrO2-Ab- cTnl- Fab -ALP + Cr02-Ab + Fab -ALP CrO厂Ab- cTnl- Fab, -ALP + Cr02-Ab + Fab -ALP 清洗 CrO厂Ab- cTnl- Fab7 -ALP + CrO2-Ab （转移到比色杯） FADP CrO2-Ab- cTnT- Fab -ALP FAD + Pi A apo D-氨基酸氧化酶 FAD 全D-氨基酸氧化酶 ? D?脯氨酸+ 0, 全D?氨基酸氧化酶 H2O2 ? H2O2 + DCHBS + 4-AAP HRP 颜色（在510nm处吸收） ? 2标本采集与处理 1采血方法 空腹不抗凝静脉血2?3ml。 2标本保存 室温保存，及时送检和检测。样本在2?LC下可存储14天，在-20 °C下可保存8周。 3注意事项 推荐选用血清。在存在EDTA.柠檬酸盐、草酸盐下采集的血样和含抗凝血剂不足的冷冻血浆，可 能导致珞颗粒的凝结，不可以使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。 3试剂和设备 1试剂 采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。 页码：第页共页 1. 1试剂组成 试剂船1孔为FADP 0. 056 mg/mL, D-脯氨酸68. 8mg/mL,片剂；2孔为Apo-D-氨基酸氧化酶0. 23 mg/mL,辣根过氧化物酶,过氧化物酶 0. 19 mg/mL, DCHBS 3.9 mg/n）L, 4-AAP 1. 18 mg/mL,片剂;5 孔为抗体-Cr02 1.6 mg/mL,片剂；6孔为抗体-碱性磷酸酶,液体；7孔为缓冲液，稳定剂,液体；8 孔为珞片剂稀释液，稳定剂，液体。 1.2试剂准备 直接使用。 1.3试剂保存 试剂2-8°C保存，有效期内稳定。 2质控品 美国BIORAD质控液。 3.3校准品 西门子校准品。 3.4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500~3000「/min,离心6~10min,分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏 与2-8 °C的冰箱内。 4标本检测 4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter?在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按ente「在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需耍选择相应的 按键改变Mode （按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。 4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 页码：第页共页 样品检测。 4.4.4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按口期放好，保存期为7天。 5校准程序 1校准品進备和储存 直接使用，2?8 °C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5:PR0CESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-*F2:SET-U