α生育酚对链脲菌素诱导离体大鼠胰岛β细胞损伤的干预研究生理学专业论文.docxVIP

重庆医科大学硕士研究生学位论文符号说明 重庆医科大学硕士研究生学位论文 符号说明 英文缩写 英文全称 中文全称 q．T 仅．tocopherol Q一生育酚 STZ streptozotocin 链脲菌素 SOD superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 MDA malondialdehyde 丙二醛 T-AOC total anti．oxdation competence 总抗氧化能力 NOS NO svmhaSe 一氧化氮合酶 eNOS endothelial cell NOS 内皮细胞型一氧化氮合酶 iNOS inducible NOS 诱生型一氧化氮合酶 nNOS neuron NOS 神经元型一氧化氮合酶 caspase cysteine aspartate—specific proteases特异性半胱氨酸酶 C”C cvtochrome C 细胞色素C FBS 岛tal bovine serum 胎牛血清 In呵 interferon 干扰素 IL—lB interleukin-1 13 白细胞介素一l 13 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 TNF tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 DTZ dithizone 双硫腙 m尉NA messenger ribonucleie acid 信使核糖核酸 DAB diaminobenzidine 二氨基联苯胺 1 重庆医科大学 重庆医科大学 研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果．据我所知，‘除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。’ 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任． 学位论文作者签名： 盘．塞 日期：墨丝星：臣：至 学位论文版权使用授权书 本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学 位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学．本人保证毕业高校后，发表论 文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学．学校有权保留并向国家有关 部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学 位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保 存论文． 论文作者签名：袁 羹 指导教师签名：互!红至；一． Et 期：羔塑多二￡三 重庆医科大学硕士研究生学位论文Q一生育酚对链脲菌素诱导离体大鼠胰岛B细胞损伤的 重庆医科大学硕士研究生学位论文 Q一生育酚对链脲菌素诱导离体大鼠胰岛B细胞损伤的 干预研究 摘 要 第一部分：分离、培养的新生大鼠胰岛B细胞形态及功 能鉴定 目的：探讨体外培养的新生大鼠胰岛B细胞的功能状态。 方法：采用胶原酶对1～3日龄Wistar大鼠胰腺组织进行分次短时 消化。倒置显微镜观察接种18h细胞生长情况。继续培养72h，双硫腙 (dithizone，DTZ)染色及胰岛素免疫组化染色鉴定B细胞，放射免 疫法检测葡萄糖刺激下胰岛素分泌水平。 结果：台盼蓝染色胰岛细胞存活率90％，DTZ染色可染率80％， 细胞分泌功能正常。 结论：胶原酶分次短时消化胰腺组织，细胞接种后及时转板的分 离培养方法为本实验提供了纯度较高、功能良好的胰岛细胞。 关键词：胰岛细胞，细胞培养 第二部分：cI一生育酚对链脲菌素诱导大鼠胰岛B细胞 损伤的干预效应 目的：探讨Q一生育酚(a-tocopherol，Q—T)对链脲菌素(strep— tozotocin，STZ)诱导大鼠胰岛B细胞损伤的干预效应。 方法：1．分组：分离l～3日龄Wistar大鼠胰腺进行体外培养， 2 重庆医科大学硕士研究生学位论文培养的细胞随机分为4组：(1)对照组：培养的胰岛细胞不作任何干预 重庆医科大学硕士研究生学位论文 培养的细胞随机分为4组：(1)对照组：培养的胰岛细胞不作任何干预 处理；(2)a—Z组：培养液中仅加入终浓度为20mg／L Q—T作用24h； (3)STZ组：培养液中仅加入终浓度为0．58mg／L的STZ作用30min；(4) 干预组：培养液中加入终浓度为20mg／L Q-Z预处理24h后，再加入终 浓度为0．58mg／L的STZ作用30min。各组作用时间一到，即离心弃上 清液，用新鲜培养液重悬细胞，继续培养18h后检测各项指标。2．方 法：采用MTT比色法检测胰岛细胞活性，放射免疫法检测上清液中胰 岛素含量，透射电镜观察细胞形态，Hochest33258荧光染色观察细胞 荧光强度，TUNEL法检