分析血浆样品中白消安的临床研究方法-Waters.PDFVIP

[ 应用纪要 ] 分析血浆样品中白消安的临床研究方法 Stephen Balloch 、Lisa Calton和Gareth Hammond 沃特世公司(英国威姆斯洛) 应用优势 简介 ■ 利用色谱和高选择性的质谱检测提高 白消安是一种双功能烷基化试剂，其生物利用度受个体年龄、疾病状态和药 分析选择性 物相互作用等因素的影响，在不同个体间差异极大1 。高准确度、高灵敏度且 ■ 宽的动态范围(范围拓宽200倍) 高选择性的分析方法可在白消安的药代动力学和药效动力学研究中发挥重要 作用。 ■ 样品制备过程简单、经济，仅使用极少 本应用纪要介绍了一种临床研究方法，使用溶于甲醇的白消安-2 H 内标对血浆 量的样品 8 样品进行去蛋白处理，然后使用配备WatersTM ACQUITY UPLCTM HSS T3色谱 ■ 分析速度快 柱的ACQUITY UPLC I-Class系统进行色谱分离，所需时间仅2.5 min，最后在 XevoTM TQD质谱仪上进行检测(图1)。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC™ I-Class系统 ACQUITY UPLC™ HSS T3色谱柱 Xevo™ TQD 图1. Waters ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQD系统。 MassLynx™软件 TargetLynx™应用管理软件 关键词 白消安，UPLC-MS/MS 1 [ 应用纪要 ] 实验 样品制备 2 白消安有证参比溶液及其稳定同位素内标( H )购自Qmx(英国艾塞克斯郡萨克斯泰德)。使用购自Golden West Biologicals(美国加利福 8 尼亚州特曼库拉)的混合血浆作为替代基质制备校准品。白消安的校准范围为0.025 ～5 µg/mL。使用相同的混合血浆制备浓度为 0.05、0.75、1.5和3.5 µg/mL的QC样品。 样品萃取 向50 µL样品中添加250 µL溶于甲醇的 0.1 µmol/L 内标(ISTD)，旋涡混合30 s，在16100 g下离心2 min。然后取50 µL上清液添加到 950 µL水中配制成最终萃取物用于UPLC-MS/MS分析。 LC条件 MS条件 系统: 配备FTN的ACQUITY UPLC I-Class 系统: Xevo TQD 进样针: 30 µL 分辨率: MS1 (0.7 FWHM) 色谱柱: ACQUITY UPLC HSS T3 MS2 (0.7 FWHM) 1.8 µm, 2.1 mm x 50 mm 采集模式: 多重反应监测 (MRM) (部件号 186003538)