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華聯提供微量 RNA
基因晶片分析服務
RNA 放大 (RNA Amplification) 技術近來被 Ovation Pico® WTA System
廣泛應用,因為臨床檢體,如:初期癌細胞、胚胎 華聯生技為滿足多元的實驗應用範疇,利用
細胞、幹細胞或組織切片等等,樣本量都偏少且珍 NuGEN 所開發 ,以Ribo-SPIA® 為核心技術的
貴,但卻蘊含重要的生物意義。現在,華聯生物科 Pico® whole transcriptome amplification (WTA)
技提供了微量 RNA 基因晶片 (只需 10 ng 量即 system (圖一) ,可以快速、簡單並且靈敏的將極微
可) 檢測服務,搭配微量 RNA 放大技術,可將少 量的 RNA (500 pg ~ 50 ng) ,在約五小時的操作時
量細胞或組織的 mRNA 進行線性放大而忠實反應 間內,經反轉錄放大至 15000 倍以上,獲得
表現情況,以極少量的樣品,做後續高通量基因晶 microgram 的 cDNA 量進行後續的研究。
片服務 ,可針對特殊的研究需求 ,滿足您的實驗設
計 ,以取得重要的生物資訊 。
RNA Amplification 技術
此技術近來已應用廣泛,因為具有代表性的檢
體,如 :初期癌細胞,胚胎細胞,幹細胞,抗藥性
篩檢細胞,組織切片,雷射顯微切片組織 (Laser
Catapult Micro-dissection, LCM) …等等,其樣本量都
非常少且珍貴。然而 ,這些具代表性的細胞或組織
樣本裡 ,往往隱藏著重要的標靶 RNA 之表現訊
息。
此外,由一個細胞萃取出的 total RNA 約有
10 picogram (pg) ,而mRNA 比例約為 1 ~ 5% ,雖
然帶的轉錄訊息非常少,卻足以主導著後續的基因
表現 。因此,若要以極微量的 RNA 樣本完成諸
如:Microarray 、Real‐time qPCR 、FISH 、Northern
Blot 、免疫組織染色等相關實驗,能夠放大而忠實 圖一、Ribo-SPIA WTA 之 cDNA 放大技術。(Total RNA) :經
呈現微量 RNA 表現情況的 RNA amplification 過微量萃取技術取得的 RNA ,經過Quality 驗證,準備進行反
system 為相當重要的工具。 轉錄實驗。(First Strand cDNA) :利用random 引子與 poly-T
1 華聯快訊 2011.08
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引子兩種引子,其後端都接上一 SPA adaptor 的引子,同時進 圖二、BioPrime® Indirect Labeling System 。主要利用的是
行反轉錄得到 first strand cDNA 。注意 SPA adaptor 屬於 random 引子隨機黏上放大後之單股 DNA ,加入dNTPs (包含
RNA 的設計,做為下一步實驗的引子作用。(Double-stranded 修飾過的 aha-dUTP) ,在加入Exo-Klenow 扮演 polymerase
cDNA) :利用RNA dependent DN
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