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128 Chin J Stroke, Feb 2015, Vol 10, No.2 ·论著· 生长相关蛋白-43影响神经细胞分裂 方向作用的研究 1 2 3 黄蕊 ，文玉军 ，鞠莉莉 基金项目 【摘要】 国家自然科学基金 目的 研究生长相关蛋白-43（growth associated protein-43，GAP-43）与G蛋白对神经细胞分裂方向 的调控，探讨GAP-43参与神经发生的机制。 作者单位 1 方法 6只C57BL／6J GAP-43高表达的转基因孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为实验组，6 100020 北京 只野生型孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为对照组。分别取E13.5 d的3只实验组及对照组胎 首都儿科研究所儿科临 床病理生理研究室 鼠，脑室区进行免疫荧光染色测定GAP-43的表达位置；再分别取E13.5 d的12只实验组及对照组胎 2 宁夏医科大学基础医学 鼠，向脑中加入裂解液分别提取膜蛋白和细胞质蛋白，通过Western blot测定GAP-43的表达位置及 院 表达量；取E17.5 d的3只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行GAP-43和G蛋白的免疫荧光共染色， 3首都医科大学神经生物 观察二者的共定位情况；取E17.5 d的9只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行免疫共沉淀（co- 学系 immunoprecipitation，co-IP）检测GAP-43与Gαi间的相互作用。取E13.5 d和E17.5 d的9只实验组胎鼠计 通信作者 数转基因胚胎鼠脑中神经前体细胞（neuro progenitor cell，NPC）中沿水平和垂直不同方向分裂的细胞 黄蕊 数量，并与对照组小鼠进行对照。 huangrui_alice@126.com 结果 E13.5 d实验组胎鼠的GAP-43蛋白的表达量高于对照组（P0.05）；GAP-43特异性表达于细 胞膜上；免疫荧光共染色结果表明GAP-43与Gαi共定位于细胞膜上，进一步通过co-IP证明GAP-43和 Gαi相互结合；E13.5 d时，转基因组与对照组相比，细胞沿水平、中间和垂直角度分裂的细胞数量差异 有显著性（P0.05）。 结论 GAP-43可调控神经细胞分裂方向，这可能是GAP-43参与神经发生的机制。本研究为进一步 研究GAP-43对卒中后神经损伤修复的作用机制提供基础。 【关键词】 生长相关蛋白；转基因小鼠；Gαi；细胞分裂平面；神经发育 【DOI】 10.3969/j.issn.1673-5765.2015.02.006 Growth Associated Protein-43 Influences the Orientation of Cell Division in the Brain HUANG Rui*, WEN Yu-Jun, JU Li-Li. *Clinical Physiology Research Center, Capital