超高效分子排阻及离子交换色谱系统的日常使用与维护指引.pdf

[技术简报] 超高效分子排阻及 离子交换色谱系统的 日常使用与维护指南 目的 ACQUITY UPLC系统的正确安装与维护，提供 概述超高效液相系统的日常维护与使用 稳定可靠的SEC与IEX分离。 的操作规范，当其配合在分子排阻及离 子交换色谱中所采用的高离子强度、 100%水流动相的典型流动相时。 流动相： 25 mM 磷酸钠, 150 mM 氯化钠, pH 6.8 0.14 流速： 0.4 mL/min 进样量： 4 L 0.12 波长： 280 nm 背景 0.10 0.08 鉴于生物药物的复杂性，对其充分表征 U A 通常需要各种正交性方法。许多色谱技 0.06 术都是在反相条件下进行的，而其他技 0.04 Time = 1 hour 术都是在自然的分离条件下进行，要求 0.02 Time = 2.17 days 高离子强度100%的水溶液洗脱。对于高 0.00 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min 效液相系统，这些条件就可能发生问题： 在没有杀菌剂的情况下，缺乏正确维护 图1. 微生物生长对蛋白质混合物的SEC色谱的影响。通过对色谱柱筛板的分析 会导致在几个小时内就发生细菌污染。 确认污染。 高盐浓度的存在会增加流动相含有颗粒 的可能性。LC系统中存在细菌和颗粒会 流动相： 25 mM 磷酸钠, 150 mM 氯化钠, pH 6.8 影响色谱质量和色谱柱的使用寿命。 0.015 流速： 0.4 mL/min 进样量： 4 L 0.010 波长： 280 nm