反相高效液相色谱法测定发酵液中他克莫司含量-南京工业大学学报.PDFVIP

第３１卷第３期 南　京　工　业　大　学　学　报　（自然 科 学 版） Ｖｏｌ．３１Ｎｏ．３ ２００９年５月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＮＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ２００９ 反相高效液相色谱法测定发酵液中他克莫司含量 １ １ １ ２ 陈　林 ，杨文革 ，胡永红 ，华　鹏 （１．南京工业大学制药与生命科学学院，江苏 南京 ２１０００９； ２．南京师范大学生命科学学院，江苏 南京 ２１００９７） 摘　要：建立了发酵液中他克莫司的ＲＰ ＨＰＬＣ测定方法．采用ＫｒｏｍａｓｉｌＣ（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５ ｍ）色谱柱，流 ８ μ 动相为Ｖ（异丙醇）∶Ｖ（水）＝３５∶６５，柱温５０℃，流速１０ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２２０ｎｍ，对影响分离和检测的色谱柱、流 动相、柱温、检测波长等进行了筛选．结果表明，他克莫司标准品质量浓度在１０～１００ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好，线 性方程为ｙ＝０１９４９ －００５５３（ｒ＝０９９９６），发酵液试样中他克莫司的平均回收率为９９８％ （ｎ＝９），相对标准 ρ 偏差为０５８％． 关键词：他克莫司；ＲＰ ＨＰＬＣ；定量测定 中图分类号：Ｒ９１７　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１６７１－７６２７（２００９）０３－００２９－０４ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｉｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｂｒｏｔｈｂｙ ｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ １ １ １ ２ ＣＨＥＮＬｉｎ，ＹＡＮＧＷｅｎｇｅ，ＨＵＹｏｎｇｈｏｎｇ，ＨＵＡＰｅｎｇ （１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９，Ｃｈｉｎａ ２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＮａｎｊｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈＲＰＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｉｎｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａ ｔｉｏｎｂｒｏｔｈ，ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｏｎａＫｒｏｍａｓｉｌＣｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５ ｍ）．Ｔｈｅ ８ μ ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌｗａｔｅｒｏｆ３５∶６５ｗｉｔｈｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１０ｍＬ／ｍｉｎ，ｗａｖｅｌｅａｇｔｈｗａｓ２２０ｎｍ ａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ５０℃．Ｔｈｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｃｏｌｕｍｎ，ｔｈｅｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ，ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｎｄｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｍｅｔｈｏｄｔｏｑｕａｎｔｉｆｙｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｂｙＲＰＨＰＬＣｗａｓｖａｌｉｄａｔｅｄｆｒｏｍ１０ｔｏ１００ｍｇ／Ｌ ｗｉｔｈｓａｔｉｓｆｉｅｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕ