稀土穴状荧光配合物的合成与光谱性质-应用化学.PDF

第３４卷 第３期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３４Ｉｓｓ．３ ２０１７年３月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｍａｒ．２０１７ 稀土穴状荧光配合物的合成与光谱性质 常　宇　谢文兵　周誓红　李俊玲　刘宝峰　潘利华 （中国科学院长春应用化学研究所，高分子复合材料工程实验室　长春 １３００２２） 摘　要　以２，６二甲基吡啶３，５二甲酸二乙酯为起始原料，经Ｎ溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）溴代、亲电取代反应 合成了时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂２，６｛Ｎ，Ｎ′，Ｎ，Ｎ′［二（２，２′联吡啶６，６′二甲基）］二（氨甲 基）｝吡啶３，５二羧酸二乙酯。经差热分析仪（ＤＴＡ）、傅里叶变换红外光谱仪（ＦＴＩＲ）、核磁共振波谱仪 １ （ＨＮＭＲ）、质谱仪（ＭＳ）等技术手段表征确认了化合物结构和性能。对该化合物与铕离子形成螯合物的荧光 ５ ７ 性质研究表明：激发光谱波长范围较宽，激发峰值为 ３２２ｎｍ；荧光发射峰为 ５９７ｎｍ（ＤＦ）、６１８ｎｍ ０ １ ５ ７ （ＤＦ）；荧光寿命为９１８ ｓ；量子产率 ＝０２４９。 ０ ２ μ Φ 关键词　均相时间分辨荧光免疫分析；螯合剂；合成；穴状联吡啶衍生物 中图分类号：Ｏ６２６　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１７）０３０３６１０６ ＤＯＩ：１０．１１９４４／ｊ．ｉｓｓｎ．１００００５１８．２０１６．０３．１６０２３２ 时间分辨荧光免疫分析技术（ＴＲＦＩＡ，ＴｉｍｅＲｅｓｏｌｖｅｄＦｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）作为一项新型非放射性免 ［１４］ 疫分析技术 ，利用稀土离子发射光谱窄、荧光寿命长、荧光强度高、斯道克斯位移大的特点，用稀土离 子标记抗原和抗体等生物样品，采用时间分辨技术，克服了荧光免疫分析生物样品自身的大分子的散射 等引起了高背景的缺点，极大地提高了分析灵敏度。 均相时间分辨荧光免疫分析（ＨＴＲＦ，ＨｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓＴｉｍｅＲｅｓｏｌｖｅｄＦｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）是对ＴＲＦＩＡ技 术的进一步发展，是ＴＲＦＩＡ和荧光共振能量转移（ＦＲＥＴ，ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＲｅｓｏｎａｎｃｅＥｎｅｒｇｙＴｒａｎｓｆｅｒ）的融 合，提供了更高的灵敏度和稳定性［５９］。ＨＴＲＦ系统除用于临床快速检测外，还可用于药物筛查、ＤＮＡ原 位杂交分析、生物传感器、生物学领域的荧光探针、流式细胞仪、液相层析、电泳及组织化学研究等领域。 对分子生物学、基础医学研究和临床诊断、生物制药、食品检验等行业发展具有重要价值。ＨＴＲＦ技术的 实验方法更灵活可靠，极大地拓展了ＴＲＦＩＡ的应用领域。 ＨＴＲＦ最重要的核心技术是制备高效、高荧光强度的稀土双功能螯合剂的稀土配合物。用于免疫分 析的稀土配合物与常规的稀土配合物不同，它必须存在可与生物物质连接的官能团，它不但要求高稀土 量子产率、发光强度和动力学稳定性，而且还要求其在水中有较好的溶解性，荧光淬灭尽可能小，在荧光 标记蛋白质时，不能使被标记物的免疫活性降低。因此，设计合成满足上述要求的稀土配合物，一直是 在免疫分析领域具有挑战性的课题［１０１４］。而用于能量转移要求的ＨＴＲＦ系统，对稀土配合物提出了更 高要求，因此探索一直在进行中。 本研究在合成Ｎ，Ｎ′，Ｎ，Ｎ′［二（２，２′联吡啶６，６′二甲基）］二胺基础上，以２，６二甲基吡啶３，５ 二甲酸二乙酯为原料经过甲基溴化、亲电取代等合成了化合物２，６｛Ｎ，Ｎ′，Ｎ，Ｎ′［二（２，２′联吡啶 ６，６′二甲基）］二（氨甲基）｝吡啶３，５二羧酸乙酯。通过差热分析（ＤＴＡ）、红外光谱（ＦＴＩＲ）、核磁共振 １ （ＨＮＭＲ）、质谱（ＭＳ）等确认其结构。对该化合物与铕离子结合水解后所形成的螯合物荧光性质进行 了研究。所设计螯合物的结构及合成路