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小菜蛾中肠氨肽酶N3基因片断克隆技巧及其表达量-应用昆虫学报
应用昆虫学报 Chinese Journal of App lied Entomology 20 11 ，48 (2 ):280—284
N3
小菜蛾中肠氨肽酶 基因片断克隆
技巧及其表达量*
常晓丽 吴青君 王少丽 徐宝云 张友军
(中国农业科学院蔬菜花卉研究所 北京 10008 1)
， PCR PCR ， Plutella
摘 要 本研究通过设计简并引物 并且进行温度梯度 和二次 最终筛选出适合扩增小菜蛾
xylostella (L . ) APN3 ( N3 ，Aminopeptidase N3 ) ， APN3 、APN3
中肠 氨肽酶 片段的引物和温度 这为研究 的基因功能
APN 。 ， APN3
同 其他同工酶之间的亲缘关系奠定了基础 通过比较电泳图谱 发现 在小菜蛾中肠中的表达量远远
APN1 、APN2 APN5 。 APN ，APN3 APN1
低于 和 的表达量 小菜蛾中肠 同工酶氨基酸序列分析发现 同 的亲缘关系
， APN2 。 Bt Bt
最近 同 的亲缘关系最远 以上结果对于揭示 毒素作用于小菜蛾的机理以及小菜蛾对 毒素的抗性分
子机制具有重要理论意义。
，APN3 ， ， ，
关键词 小菜蛾 克隆技巧 表达量 亲缘关系
Clone technique and expression level of partial APN3
cDNA originated from Plutella xy lostella midgut
CHANG Xiao-Li WU Qing-Jun WANG Shao-Li XU Bao-Yun ZHANG You-Jun
(Institute of Vegetables and Flowers ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Beijing 10008 1 ，China)
Abstract The APN3 gene from the midgut of Plutella xylostella (L . )was amplified using temperature gradient PCR with
degenerate primers. Two weak bands were apparent after electrophoresis of the first PCR
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