松香人工抗原的合成及多克隆抗体的制备-食品科学技术学报.PDF

第36卷 第6期 食 品 科 学 技 术 学 报 Vol.36 No.6 2018年11月 Journal of Food Science and Technology Nov. 2018 51 doi:10.3969/ j.issn.2095鄄6002.2018.06.008 文章编号:2095鄄6002(2018)06鄄0051鄄07 引用格式:卞欢,仇新媛,李鹏鹏,等.松香人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学技术学报,2018,36(6):51-57. BIAN Huan,QIU Xinyuan,LI Pengpeng,et al. Synthesis of artificial antigens and preparation of multi鄄clonal antibody against rosin[J]. Journal of Food Science and Technology,2018,36(6):51-57. 松香人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 1 1,2 1 1 1,* 卞摇 欢 ,摇 仇新媛 ,摇 李鹏鹏 ,摇 陈摇 琳 ,摇 耿志明 ,摇 1 1,3 王道营 ,摇 徐为民 (1.江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏 南京210014; 2.南京工业大学生物与制药工程学院,江苏 南京211816; 3.江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心,江苏 南京210095) 摘摇 要:利用脱氢松香胺(DHAM)为半抗原合成了松香的完全抗原、并通过免疫新西兰大白兔制 备了多克隆抗体。 首先DHAM与琥珀酸酐(SUC)反应合成琥珀酸单酰脱氢松香胺(DHAM鄄SUC), 然后再与牛血清蛋白(BSA)和钥孔血蓝蛋白(KLH)进行偶联,合成了松香的完全抗原DHAM鄄SUC鄄 BSA和DHAM鄄SUC鄄KLH,偶联比分别为12 和35。 以DHAM鄄SUC鄄KLH 为免疫原对新西兰大白兔 5 进行免疫,制备了抗血清,效价达1郾28 伊10 ,脱氢松香酸(DHA)和松香酸(AA)的50%抑制浓度 (IC )分别为25郾1滋g/ L和36郾4 滋g/ L。 研究合成的松香人工抗原具有理想的免疫原性,获得的多 50 克隆抗体具有较好的灵敏度,可为建立畜禽肉制品中松香残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法 打下基础。 关键词:松香;脱氢松香胺;人工抗原;多克隆抗体;酶联免疫吸附分析方法 中图分类号:TS207郾7摇 摇 摇 摇 摇 文献标志码:A 摇 摇 松香是松树含油树脂蒸去松节油后得到的透明 后续的加工(腌制、蒸煮、烘烤等)有效去除[10-11]。 固体物质,是用于制造肥皂、纸张、油漆涂料等的重 2009年,我国颁布《食品安全法》,禁止在畜禽屠宰 要化工原料。 松香主要由松香酸(abietic acid,AA) 加工过程中使用松香二次脱毛。 但在实际生产中, 和脱氢松香酸(dehydroabietic acid,DHA)等组成,按 中小畜禽屠宰企业受利益驱动,违禁使用松香加工 照来源的不同,松香可分为脂松香、木松香和浮油松 畜禽的现象依然十分严重,畜禽屠宰加工中非法使 香[1-2]。 AA和DHA可以导致皮肤过敏,而二者的 用松香脱毛的现象屡有媒体曝光,松香残留导致的 氧化产物则被认为是主要的致敏物质[3-4]。 毒理学 质量安全隐患已引起社会关注。 因此,建立健全并 研究表明,AA和DHA可引起人体肺泡上皮细胞溶 推