槲皮黄酮改善心肌细胞肥大过程中对线粒体功能及动力学的影响.PDF

年 月第 卷第 期 天 津 中 医 药 ２０ 19 1 36 1 Jan. ２０ 19熏Ｖｏｌ ．36 Ｎｏ ． 1 Ｔｉａｎｊｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 83 ： DOI 10.11656/j .issn.1672-1519.20 19.0 1.22 槲皮黄酮改善心肌细胞肥大过程中对 线粒体功能及动力学的影响 1 1 2 吴 舜 ，陈明君 ，周 燕 （1 .武汉市新洲区人民医院内分泌科，武汉 430400 ；2.武汉市新洲区人民医院心内科，武汉 430400 ） 摘要 ：[ 目的] 探讨槲皮黄酮对原代心肌细胞肥大、线粒体功能及动力学的影响。[方法] 原代培养大鼠心肌细胞， 采用血管紧张素II（AngII ）及槲皮黄酮共同干预细胞48、72 h 后，BCA 试剂盒检测细胞中蛋白浓度，倒置显微镜分析 心肌细胞直径；酶标仪检测心肌细胞内三磷酸腺苷（ATP ）及活性氧（ROS ）含量，JC-1 方法分析心肌细胞线粒体膜电 位（MMP ）；蛋白免疫印迹（Western Blot ）方法测定线粒体动力学相关蛋白视神经萎缩蛋白（OPA 1）、动力相关蛋白 （Drp 1）及磷酸化动力相关蛋白1（p-Drp 1）表达量。[结果] 与空白组比较，模型组心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大 小及ROS 水平显著升高（P0.05 ），ATP 和MMP 值则显著降低（P0.05 ），Western Blot 结果发现OPA 1 蛋白表达水平 显著降低（P0.05 ），p-Drp 1 蛋白表达水平显著升高（P0.05 ）；与模型组比较，槲皮黄酮处理72 h 后心肌细胞中总蛋 白浓度、细胞直径大小及ROS 水平显著降低（P0.05 ），ATP 和MMP 值则显著升高（P0.05 ），Western Blot 结果发现 OPA 1 蛋白表达水平显著增高（P0.05 ），p-Drp 1 蛋白表达水平显著降低（P0.05 ）。[结论] 槲皮黄酮对AngII 引起的心 肌细胞肥大具有保护作用，其作用机制可能与降低心肌细胞线粒体功能障碍、稳定线粒体动力学平衡相关。 关键词 ：槲皮黄酮；心肌细胞；肥大；线粒体 中图分类号 ：R285.5 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672-1519（2019）01-0083-04 随着对心脏疾病研究的不断深入，心肌细胞能 通利华实验动物中心，许可证号SCXK（京）2006-0009。 量代谢紊乱及凋亡的研究已成为当前热点。心肌细 1.2 主要试剂及仪器 槲皮黄酮（中国食品药品检 胞能量代谢的主要场所在线粒体，而且细胞凋亡的 定研究院，批号 100357-20 1603 ），DMEM 培养基、II [1] 起始也发生在该细胞器 。线粒体功能障碍会导致 型胶原酶、FBS （美国Gibco 公司），胰蛋白酶（美国 心力衰竭（心衰）的发生发展，因此改善线粒体功能 Hyclone 公司），AngII（美国Sigma 公司），CCK8 试剂 [2] 是治疗心衰的重要环节 。线粒体功能障碍及其动 盒（Ameresc 公司），BCA 试剂盒（上海碧云天公司）， [3] 力学失衡是心肌肥厚发生的重要诱导因素 ，因为 三磷酸腺苷（ATP ）试剂盒、JC-1 试剂盒（英国Abcam 线粒体在心肌细胞能量代谢、信号传导、细胞增殖 公司），兔抗鼠视神经萎缩蛋白（OPA 1）、动力相关蛋 1 Drp 1