阴沟肠杆菌定量标准物质的研制-计量学报.PDFVIP

第３８卷　第５期 计　　　 量　　　学　　　报 　 Ｖｏｌ．３８，№５ ２０１７年　９月 ＡＣＴＡ　ＭＥＴＲＯＬＯＧＩＣＡ　ＳＩＮＩＣＡ 　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２０１７ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１１５８．２０１７．０５．０２ 阴沟肠杆菌定量标准物质的研制 １ １ ２ １ １ １ 陈敏 ，　傅博强 ，　林　婧 ，　张　玲 ，　隋志伟 ，　王　晶 （１中国计量科学研究院，北京 １０００２９；　２南京市计量监督检测院，江苏 南京２１００４９） 摘要：采用真空冷冻干燥法和滤膜法定值技术，研制了球状的阴沟肠杆菌定量标准物质。经保护剂配方及 冻干程序参数优化后，阴沟肠杆菌的平均存活率达５１％，形状均匀一致、外观光滑无塌陷，能完全复水速溶。通 过结晶紫中性胆盐琼脂培养基平板计数法考察均匀性和稳定性，证明该标准物质均匀性良好，－８０℃至少可稳 定保存 ６个 月。该标 准物质 由 ６家实验室采用滤膜法联合定值，经不 确定 度评 定，标称值为 （２０±０１）ｌｏｇ（ｃｆｕ／瓶），相对扩展不确定度为 １０％（ｋ＝２）。标准物质中阴沟肠杆菌活菌数含量水平为 １０ ２ １０ｃｆｕ／瓶，可以直接溶解使用，无需稀释，使用方便，同时减少了测量不确定度来源。 关键词：计量学；总大肠菌群；阴沟肠杆菌；标准物质；真空冷冻干燥法；滤膜法 中图分类号：ＴＢ９９　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１０００１１５８（２０１７）０５０５２７０５ ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＲｅｆｅｒｅｎｃｅＭａｔｅｒｉａｌｏｆ ＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒＣｌｏａｃａｅ １ １ ２ １ １ １ ＣＨＥＮＭｉｎｆａｎ，　ＦＵＢｏｑｉａｎｇ，　ＬＩＮＪｉｎｇ，　ＺＨＡＮＧＬｉｎｇ，　ＳＵＩＺｈｉｗｅｉ，　ＷＡＮＧＪｉｎｇ （１ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｔｒｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２９，Ｃｈｉｎａ； ２ＮａｎｊｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１００４９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｍａｔｅｒｉａｌｉｎｇｌｏｂｕｌａｒｓｈａｐｅｆｏｒｔｈｅｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｖａｃｕｕｍ ｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇａｎｄｆｉｌｔｅｒｍｅｔｈｏｄＴｈｅｖｉａｂｌｅｃｏｕｎｔｏｆｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅｐｅｒｓｐｈｅｒｅｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｉｎｃｆｕｖａｌｕｅｂｙｆｉｌｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅｍｅｔｈｏｄＡｆｔｅｒｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔａｎｄｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｐａｒａｍｅｔｅｒｓ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅ ｒｅａｃｈｅｄ５１％Ｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｍａｔｅｒｉａｌｈａｓｕｎｉｆｏｒｍｓｈａｐｅ，ｓｍｏｏｔｈａｐｐｅａｒａｎｃｅａｎｄｇｏｏｄｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕａｂｉｌｉｔｙＴｈｅｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙ ａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｍａｔｅｒｉａｌｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｐｌａｔｅｃｏｕｎｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄｏｎｖｉｏｌｅｔｒｅｄｂｉｌｅａｇａｒ （ＶＲＢＡ）ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ