附录一染色液的配制.DOC

附录一 染色液的配制 1、吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2、石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 B液：5%石炭酸溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、配成A液。 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3、革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）沙黄（蕃红）复染液： 2.5%沙黄（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4、芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%沙黄溶液。 5、荚膜染色液 将黑色素在蒸馏水中煮沸5min，配成5%溶液，然后加入福尔马林（40%甲醛）0.5%(V/V)作防腐剂。 （2）沙黄染色液 与革兰氏染色液中的沙黄复染液相同。 6、鞭毛染色液 A液：单宁酸5.0g、FeC13 1.5g、蒸馏水100ml，福尔马林（15%）2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。 配好后应当日使用，次日即效果差，第三日则不能使用。 B液：2%AgNO3溶液 待AgNO3溶解后，取出10ml备用。向其余的90ml AgNO3中滴入浓NH4OH，使之成为很浓厚的悬浮液，再继续滴加NH4OH，直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将10ml德用的AgNOa溶液慢慢滴入。此时会出理薄雾，轻轻摇动后，薄雾状沉淀又消失，再滴入AgNO3溶液直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重，此染液可使用一周；如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 7、乳酸石炭酸棉蓝染色液 石炭酸2.0g、甘油40ml、乳酸（密度1.21）20ml、蒸馏水20ml、棉蓝（Cotton blue）0.05g 石炭酸在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即成。 8、富尔根氏（Feulgen）核染色液 （1）Schiff氏试剂：将1g碱性复红加于200ml煮沸的蒸馏水中，振荡5分钟，冷却至50℃左右过滤。加入1.0NHC120ml，摇匀。待冷至25℃时，加Na2S2O5（偏重亚硫酸钠） 在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥，以消除还原性物质。 （2）Schandium 固定液 取50ml升汞水溶液加95%酒精25ml。 B液：冰醋酸 取A液9ml加B液1ml，混匀后加热至60℃ （3）亚硫酸水溶液 10%偏重亚硫酸钢水溶液5ml、1MHC115ml、蒸馏水100ml。 9、Albert氏异染颗粒染色液 A液：甲苯胺蓝0.15g、孔雀绿0.2g、95%酒精2ml、蒸馏水100ml先将甲苯胺蓝及孔雀绿溶解于酒精中，再加蒸馏水及冰醋，放置24小时，以滤纸过滤即可。 B液：先将碘化钾3g溶于10ml蒸馏水中，再加碘片2g，待溶解后，加蒸馏水至300ml。 10、Neiser氏异染颗粒染色液 A液：美蓝1g溶于95%酒精2ml后，加冰醋酸5ml及蒸馏水95ml，用滤纸过滤。 B液：斯麦褐0.2g溶于100℃ 11、Ponder氏异染颗粒染色液 甲苯胺蓝0.1g、一号天青0.1g、美蓝0.1g、95%酒精5ml、蒸馏水120ml、冰醋酸1ml。 12、苏丹黑-B染色液 苏丹黑-B（Sudan black B）0。5g溶于100ml70%的酒精中。 13、苏丹Ⅲ染色液 苏丹Ⅲ（SudanⅢ）的95%酒精饱和液。 14、碘液（肝糖颗粒染色用） 碘片1g、碘化钾3g、蒸馏水100ml。 先将碘化钾溶于蒸馏水中，再加碘片溶解后即可。 15、石炭酸蕃红染色液 蕃红0.1kg溶于10ml95%酒精中，再加入30%石炭酸90ml。 16、酸性酒精 盐酸（密度1.19）3ml、95%酒精97ml。 17、0.1%美蓝染色液 吕氏美蓝染色液46 ml加蒸馏水54 ml。 18、F-5酸性坚膜定影液 水（52℃）600 ml、大苏打（硫代硫酸钠）240、亚硫酸钢15g、醋（28%）48ml、硼酸（硫酸铝钾）15g 加冷水至1000 ml。 19、显影液