重组腺病毒介导的KDR-CDglyTK基因靶向杀伤胃癌细胞的体外.PDFVIP

· 16 · %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%南方医科大学学报(J%South%Med%Univ)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%2010;30(1) 重组腺病毒介导的KDR-CDglyTK 基因靶向杀伤胃癌细胞的体外实验研究 李 强，黄宗海，厉 周，俞金龙（南方医科大学珠江医院普外科，广东广州510282 ） 摘要：目的 探讨腺病毒介导KDR%启动子驱动的双自杀基因体系对人胃癌细胞SCG7901 靶向杀伤作用以及是否存在 旁观者效应。 方法 用MOI%=100 时， 将携带融合基因重组腺病毒Ad-KDR-CDglyTK%及Ad-CMV-CDglyTK 体外感染 、 和 细胞，检测细胞的感染效率以及转基因肿瘤细胞在 水平上融合基因的表达；在前 SCG7901 ECV304 HepG2 mRNA 药 氟胞嘧啶（ ）和 或更昔洛韦分别按不同浓度、不同作用时间和方式下，观察双自杀基因体系对 细胞 5- 5-FC / SCG7901 的靶向杀伤作用和旁观者效应。 结果 携带双自杀基因（CDglyTK ）和报告基因(GFP) 的重组腺病毒载体，感染复数为 时， 以上的受感染 、 和 细胞中有 表达。 感染腺病毒 的各细胞 100 95% SCG7901 HepG2 ECV304 GFP Ad-CMV-CDglyTK 以及感染腺病毒Ad-KDR-CDglyTK 的SCG7901 及ECV304 细胞对单一前药具有较高的敏感性，细胞的存活率各随单 一前药浓度的增加而递减 ； 而感染腺病毒的 Ad-KDR-CDglyTK 的 HepG2 细胞对前药不敏感。 感染腺病毒 Ad-KDR-CDglyTK 的SCG7901 及 ECV304 细胞分别在同一浓度前药的作用下， 细胞的存活率与时间存在依赖关系， 而感染腺病毒Ad-KDR-CDglyTK 的HepG2 细胞不存在依赖关系。 将感染腺病毒的细胞与未感染的细胞按不同比例混 合培养，观察到该体系明显的旁观者效应，并随转基因细胞的比例增加逐渐递增。转基因 SCG7901 和同种细胞混合，在 联合应用前药时，不同混合细胞比例下均出现药物协同作用。 结论Ad-KDR-CDglyTK 双自杀基因可在体外靶向杀伤 、 细胞并观察到在细胞中存在旁观者效应，联合应用前药可产生明显的协同作用。 SCG7901 ECV304 关键词：胃癌；自杀基因治疗；血管内皮生长因子受体；旁观者效应 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） R73-354%%%%%%% A%%%%%%%% 1673-4254 2010 01-0016-05 Inhibitory effect of recombinant adenovirus containing CDglyTK double suicide gene driven by KDR promoter on human stomach adneocarci