电泳技术在无尾两栖类系统分类中的应用-四川动物.PDFVIP

电泳技术在无尾两栖类系统 分类中的应用※ 杨 玉 华 (四 川 大 学 生 物 系 ) 浆蛋白的 泳技术便日益广泛、深入地运用于无尾两栖类的分类、进化研究中，在经典分类的基础 上，为无尾两栖类的种间或种下不同类群的系统分类提供了一种非常有价值的工具。 一 、 电 泳 数 据 的 意 义 自然种群具有大量的遗传变异，这些遗传变异的存在是进化的必要条件。对遗传变 异的定量估计，经典的遗传学方法是无能为力的，而分子遗传学方法，如蛋白质序列分 析、蛋白质免疫技术，DNA杂交和电泳技术则是定量估计遗传变异，研究近缘种的进 化的有效方法。 现用于无尾两栖类系统分类研究中的电泳技术，主要是蛋白质(酶)的电泳分析。 不同的蛋白质，由于所含的氨基酸种类和数量的差异，因而所带的净电荷亦不相同，在 电场中移动的速度(迁移率)也不同。电泳技术正是利用这一原理将蛋白质分离开。按 照分子遗传学的中心法则，生物的蛋白质分子是由该生物的遗传信息(DNA或RNA) 所决定的。因此电泳后由组织化学染色法所显示的电泳图谱的表型，诸如带的数目，深浅 及迁移率便客观地反映了该蛋白质所对应的等位基因的遗传本质。不同生物中相应的蛋 白质常常是不相同的，这就形成了生物体内蛋白质的物种特异性，这种特异性便可以作 为生物系统分类的重要依据之一。 类作用于共同的底物，但是电泳迁移率不同的酶。别位酶是指同一基因座位上不同等位 基因所编码的蛋白质，它们的电泳迁移率不同并且在群体中的分离行为符合孟德尔定律 油异构酶、 6—磷酸葡萄糖脱氢酶等与糖代谢有关的酶及酯酶等。 用蛋白质和酶的电泳数据估计遗传变异的量及研究种群间的系统分类的方法很多， 但主要有以下几种。 (一)基因型频率和等位基因频率 ※本文在写作过程中得到陈文元副教授、王子淑、王喜忠老师和中国科学院成都生物研究所赵尔宓副研究员的 指导和帮助，谨致谢意。 35 经典遗传学方法只能直接观察表现 血型 基因型 数目 频繁 型，但不能直接观。察基因型或基因。基因 M M M L L 22 0 ．030 库的变异或者是通过基因型频率或者是通 M M MN L L 216 0 ．296 过基因频率来表示的。如果我们知道特定 M M N L L 492 0 ．674 的基因型和相应的表现型之间的关系，用 总计 730 1．000 基因型总数去除每个基因型被发现的次 数，就能将降表现型频率变换成基因型频率 引自Ayala 等，1980。 (表1)。 将某一等位基因的纯合子频率加上该等位基因的杂合子频率的一半，就可以从基因 型频率求得该等位基因的频率。用样本中等位基因的总数去除每个等位基因出现的次 数，也能求得等位基因的频率。例如上述的澳大利亚土著居民中，等位基因L#的频 率是：0.030+1／2× 0.296=0.178，或(2×22)+216／1460=0.178；L#的频率是： 0.674+1／2×0.296=0.822，或(2×492)+216／1460=0.822。 (二)多形性和杂合性 群体 基因座位数 多形性 一个种群内多形性座位的比