双重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分中国科技论文在线.PDFVIP

四川 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) ( ) 123　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　2005; 36 1 : 119 ( ) J Sichuan Un iv M ed Sc i Ed i 双重 PCR- 毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分 1 1△ 2 1 1 周　颖 , 黎源倩 , 苏　宁 , 裴晓芳 , 雍　莉 ( ) 1. 四川大学华西公共卫生学院 卫生检测学教研室 成都 610041 ; 2. 国家进出口商品检验研究所 　　【摘要】　目的　建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法。方法　针对转基因大豆基因组中被导入的 35S 启动 子、 终止子和 4 抗草甘膦基因等外源基因, 自行设计了两对引物, 采用双重 同时扩增上述基因, NO S CP EPSPS PCR 用 8 羟丙基甲基纤维素为筛分介质, 在 50 ×100 . . 涂壁毛细管中, 于- 10 电压下用激光诱导荧光 g L cm m i d kV 毛细管电泳检测转基因大豆的 PCR 扩增产物。结果　在优化的 PCR 反应和毛细管电泳条件下, 本法可以同时检测 出转基因大豆样品中三种外源基因, 双重 PCR 扩增产物经测序证实与原基因序列完全一致, 表明本研究设计的引物 合理, 扩增结果可靠。毛细管电泳进样量仅需 5 nl, 分析时间为 24 m in , 迁移时间的相对标准偏差≤3. 2% 。结论　本 方法较常规琼脂糖凝胶电泳特异性高, 分析时间短, 重现性好, 检测灵敏, 适合于大豆中转基因成分的快速检测。 【关键词】　双重 PCR 　激光诱导荧光毛细管电泳　转基因大豆　PCR 产物检测　羟丙基甲基纤维素 【中图分类号】　 657. 311 Q - - Rap id Analysis of Genetically M odif ied Soybean by a D uplex PCR cap illary Electrophoresis System with Laser △ 　 , , , , . 　 induced Fluorescence D e