抗坏血酸合成基因参与植物抗逆性的机制初探.PPTVIP

抗坏血酸合成基因参与植物抗逆性的机制初探 导 师：李鸿彬教授 申请人：冉江霞 刘会珍 刘金强 陆永兴 主 要 内 容 一、研究背景与意义 二、国内外现状分析 三、科学价值 四、主要的研究内容 五、小结 一、项目研究背景与意义 1.1研究背景 新疆远离海洋，属温带大陆性气候。而且,该地区日照长、太阳辐射量丰富、温差大,与地球上同纬度地区的年降水量相比是偏少的。 在逆境胁迫下，植物体内许多生理生化等代谢途径会受到影响，其中包括光合作用、物质代谢、离子平衡、水分平衡等维持植物正常生长发育所必需的重要过程。 抗坏血酸(ascorbic acid , AsA)即维生素C(Vc)，普遍存在于植物组织中，是一种重要的代谢化合物，在生物体中具有重要的代谢功能和抗氧化作用。 植物上，抗坏血酸与植物的抗逆性呈正相关，它是植物抵御氧化伤害，清除光合作用、氧化分解代谢及各种逆境胁迫所产生的超氧自由基和活性氧分子的重要抗氧化剂。 抗坏血酸合成路径 1.2 研究意义 植物AsA生物合成途径的发现具有极为重要的理论意义和应用价值，应用基因工程手段，调控植物AsA生物合成与代谢相关酶基因的表达，提高AsA的含量从而增强植物本身的抗逆性。VTC1是AsA合成的关键酶，对提高植物AsA含量，增强植物的抵抗胁迫能力都起着非常重要的作用。 二、国内外现状分析 随着地球环境恶化，干旱、盐碱等非生物胁迫已成为限制植物生长发育和作物产量的重要因素。 据统计，世界干旱、半干旱地区占全球陆地面积的三分之一，我国干旱、半干旱地区占全国的二分之一；世界上将近20%的耕地和几乎一半的灌溉土壤受到盐碱的影响。 胁迫条件会使植物出现光合作用受抑制、营养物质摄取受阻、质膜解体、活性氧增多和代谢毒物积累等问题，严重的还会导致植株的死亡。 因此，研究和改良农作物的抗逆性，选育耐旱、耐盐新品种已经成为农作物品种改良和国内外学者研究的重要课题之一。 三、科学价值 （1）棉花中VTC1基因的功能及其催化的抗坏血酸合成与抗逆性之间的关系鲜有研究，本研究的开展有利于分析棉花VTC1基因的功能和阐述抗坏血酸增强植物抗逆性的可能初步机制，具有重要的基础理论研究价值。 （2）本研究成果将有利于进一步利用基因工程技术开展植物/作物抗逆性改良方面的工作，对于充分利用贫瘠土地和农作物抗逆品质改良具有重要参考价值。 四、主要研究内容 4、1 主要内容 ⑴拟南芥的遗传转化与筛选，观察拟南芥的生长 发育表型发育情况。 ⑵转基因拟南芥的非生物胁迫（盐、旱、高温、低温）处理 ⑶胁迫生理特征分析，测定脯氨酸、丙二醛等含量。 ⑷抗坏血酸含量分析，以及抗坏血酸抗氧化系统相关成分及酶活力的测定，如抗坏血酸、APX、CAT、SOD、GR、GPX酶活性测定。 技术路线： 拟南芥 棉花vtc1基因 转基因拟南芥 转有vtc1基因的拟南芥 筛选 有vtc1基因的拟南芥 干旱处理 测量各种生理指标 记录及分析结果 盐碱处理 高温处理 低温处理 注：测量的指标主要有抗坏血酸、APX、CAT、SOD、GR、GPX酶活性测定。 记录及分析结果 记录及分析结果 记录及分析结果 4.2拟解决的关键问题： 通过实验证明VTC1基因通过增加细胞内抗坏血酸含量，以及增强抗坏血酸-谷胱甘肽抗氧化系统的相关成分的表达，并且能增加脯氨酸和减少MDA的含量，从而提高植物的抗逆性。 VTC1基因 抗坏血酸含量 脯氨酸含量 MDA含量 植物抗逆性 五、小结 对于此次项目的研究，我们有足够的信心去取的成功，我们已有的实验基础有： 1、根据已查阅的关于抗坏血酸-谷胱甘肽抗氧化系统的资料； 2、目前已经克隆了棉花VTC1基因。 3、实验室及生命科学学院具备本研究所需的仪器和设备，能保证本研究顺利进行 谢谢大家 请老师批评指正