酵母菌乙醇脫氫酶與乙醛脫氫酶之抽取及其在原核系統之表達.docVIP

酵母菌乙醇脫氫酶與乙醛脫氫酶之抽取及其在原核系統之表達 Extraction of Alcohol Dehydrogenase and Aldehyde Dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae and their Expression by Prokaryotic System 研究生：戴嘉慶Jia-Chin Dai 指導教授：林茂勇Maw-Yeong Lin 【摘要】 Saccharomyces cerevisiae ( SC ) 麵包酵母菌体中含有許多具高經濟價值性且無毒性的酵素蛋白等物質，頗具經濟開發與利用效益。本試驗先以數種商業培養基培養市售11種麵包酵母菌，並測定其菌體之產量以為日後大量培養SC菌體之應用，結果篩選出Angel酵母菌( SC04 )。並以機械研磨充分打破Angel酵母菌體後，行蒸餾水抽取，再以丙酮及飽和硫酸銨次第純化乙醇脫氫酶 ( alcohol dehydrogenase；ADH )，另以檸檬酸及魚精蛋白次第純化乙醛脫氫酶 ( aldehyde dehydrogenase；ALDH )，利用NAD+ 擷取酒精及乙醛中氫離子之特性在340 nm光譜可吸收NADH之變化而測定ADH和ALDH之含量。另一方面，以聚合酶鏈連鎖反應 ( PCR ) 增幅出ADH ( 1062 bp ) 及ALDH ( 1536 bp