URP立项申请书-2019杨文才-中国农业大学园艺学院.DOCVIP

PAGE PAGE 2 中国农业大学 本科生“URP”立项申请书 项目名称 番茄疮痂病原菌T3小种突变体 的构建及其对番茄抗病性的影响 申 请 人 杨文才 工作单位 园艺学院 联系电话 010 电子信箱 HYPERLINK mailto:yangwencai@cau.edu.cn yangwencai@cau.edu.cn 填表日期 2018年12月20日 中国农业大学本科生院制 项目名称 番茄疮痂病原菌T3小种突变体的构建及其对番茄抗病性的影响 项目起止时间 2019.3-2020.3 项目申请人情况 姓名 杨文才 性别 男 出生日期 1967.9 最后学历与学位 博士 专业技术职务 教授 从事专业 蔬菜学 项目概况 番茄是世界各国广泛栽培、普遍食用的一种主要蔬菜种类。番茄疮痂病（bacterial spot）最早在南非和美国发生，随后蔓延到世界上其他番茄种植地区，成为热带、亚热带和温带地区露地番茄生产中最严重的病害之一。近10多年来，保护地番茄种植面积迅速增加，番茄疮痂病等细菌性病害已在我国番茄生产区普遍发生，逐渐成为番茄设施栽培的主要病害之一，对我国番茄产业的可持续发展造成威胁。目前生产上还没有抗性品种和有效的防治药物，培育抗病品种是最经济有效的防治措施。 番茄材料对疮痂病的抗性与病原菌的效应因子之间存在“基因对基因”的关系，即番茄材料中存在抗病基因，而疮痂病病原菌中存在相应的一个或多个效应因子。目前，根据对番茄疮痂病病原菌基因组序列的分析和预测，命名了20多个效应因子，但不同病原菌小种中的效应因子不完全相同，且不同效应因子的作用也不尽相同，这对于研究番茄材料的抗病性和抗病育种具有一定的困难。 为了明确番茄疮痂病病原菌T3小种中存在的效应因子类型、数量及其对番茄材料抗性的影响，本项目拟采用EMS处理病原菌，获得病原菌突变体，并用突变体接种不同的番茄抗病材料，以期获得病原菌致病的关键基因（效应因子），为利用抗病资源提供参考。 二、实施计划及方案(明确各个环节对培养学生创新能力的具体思路及考核办法) 学生在教师指导下通过阅读文献掌握EMS突变的原理，掌握EMS突变及鉴定、病菌培养、接种观察、抗病性评价、基因互作分析等方法和技术，最后撰写结题报告，多方面考察了学生的动手创新的能力，具体实施方案如下： 1. 文献查找与阅读 项目参加者首先阅读国内外近年来发表的相关文章，深入分析文章的思路并根据项目撰写试验方案。 该环节让学生初步接触专业文献，结合查找以及阅读文献的能力，调动学生对专业研究方向的兴趣。 考核办法：学生根据项目研究目的自拟一份实验方案及技术路线交给指导教师，由老师考核评分。 2. 试验环节 采用不同浓度的EMS处理病原菌，将处理过的病原菌通过注射接种法接种到抗病材料中，观察致病情况，确定突变菌株。对菌株进行全基因组序列分析，明确突变的基因。通过酵母双杂交和BiFC等筛选与抗病基因互作的病原菌基因（效应因子）。 这个环节将很好地培养学生独立完成实验的能力，可以学会思考如何把理论知识运用到实际操作中，同时在小组成员分工合作的过程中培养团队意识，在试验过程中提高动手能力，在试验结果分析时训练独立思考能力。 考核办法：小组成员上交阶段性的试验心得和工作报告，指导教师也将定时让学生做进展报告，通过与学生交谈，了解实验过程中遇到的问题，解答疑问，在此基础上对学生进行考核评定。 3. 结题验收 试验结束后，学生结合整理好的试验结果，按规定时间独立完成科研论文或书面总结及相应的项目研究成果，同时总结实验过程中的经验教训，并提出有根据的改进意见。 该环节主要培养学生实验分析、撰写总结等方面的能力。 考核办法：指导教师根据学生上交的书面材料考核评分。 三、项目实施的基础和条件 1. 申请人课题组一直从事番茄的抗病分子育种工作，在基因定位、图位克隆、遗传转化、寄主与病原菌互作研究等方面积累了丰富的经验，实验室拥有开本研究所需要的一切仪器设备，具备了开展本研究的条件。 2. 申请人实验室有多份可适用于本项目研究的试验材料（包括病原菌和番茄抗病材料），为保证试验的顺利进行提供材料保证。 四、学生提交的成果 1、提交相关研究报告1份； 2、提交试验过程与结果的相关图片及数据资料1份； 3、提交PPT汇报材料，并完成验收。 五、经费预算 经费预算5000元。 材料费：1000元，主要用于购买琼脂粉、营养肉汤、蛋白胨、培养皿、营养土、文献打印等。 测试化验费：4000元，主要基因组序列分析等。 六、学院URP领导小组意见 签字 （盖章