微生物学通报幽门螺杆菌东西方株CagA的序列差异及其对胃癌细胞.PDF

微生物学通报 Apr. 20, 2018, 45(4): 848−855 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.170357 研究报告 幽门螺杆菌东、西方株 CagA 的序列差异及其对 胃癌细胞生长与凋亡的影响 龙妮娅1,2 熊林1,2 赵艳1,2 袁航1,2 李雅洁1,2 陈学书1,2 张晓怡1,2 谢渊1,2 周建奖1,2,3* (1. 550004) (2. 550004) (3. 550004) 摘 要：【背景】幽门螺杆菌(Helicobacter pylori ，H . pylori )是胃癌的主要致病因素，其分泌 的细胞毒素相关基因A 蛋白(Cytotoxin associated gene A ，CagA)是目前已知唯一能被H . pylori 注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白，参与胃癌的发生发展。【目的】比较 H . pylori 东亚株和西方株CagA 结构差异，初步探讨H . pylori- CagA 对胃癌细胞增殖与凋亡的 影响。【方法】对H . pylori 东亚株和西方株CagA 的核酸及氨基酸序列进行生物信息学分析， 构建含东亚株和西方株cagA 基因的真核表达载体，转染胃癌细胞AGS ，用Western blot 法检测 CagA 蛋白的表达，用CCK8 法测定细胞的生长曲线，流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】生物 信息学分析发现H . pylori 东亚、西方菌株CagA 的核酸序列和氨基酸序列均存在特征性差异。 构建了含东亚、西方菌株cagA 基因的表达载体[命名为GZ7/cagA ( 东亚株)和26695/cagA (西方 株)] 。与空载体组比较，GZ7/cagA 和26695/cagA 转染组均表达CagA 蛋白，两组比较表达量无 显著性差异，GZ7/cagA 转染组细胞生长显著增加，而 26695/cagA 转染组细胞生长显著降低 (P0.05) 。GZ7/cagA 转染组、26695/cagA 转染组细胞的凋亡率分别为7.23±0.96 及9.17±1.40 ， 均高于空载体组(5.03±0.63) ，差异有统计学意义(P0.05) 。【结论】东亚株与西方株CagA 之 间有结构和功能的差异，东亚株CagA 能促进细胞增殖，而西方株CagA 却抑制细胞增殖，但 两者均能促进细胞凋亡。 关键词：幽门螺杆菌，CagA ，胃癌，细胞增殖，细胞凋亡 Foundation items: National Natural Science Foundation of China ; Science and Technology Planning Project of Guizhou Province (LH[2015]7360); Science and Technology Foundation of Guizhou Provincial Health and Family Planning Commission (gzwjkj2015-1-010) *Corresponding author: E-mail: jianjiangzhou@ Received: May 10, 2017; Accepted: June 23, 2017; Published online () : July 04, 2017 基金项目：(3156032631660031) (LH [2015]7360) (gzwjkj2015-1-010)