小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备.PDFVIP

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小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备

第24卷第2期 江苏大学学报(医学版) V01.24No.2 of Mar.2014 2014年3月 Journal JiangsuUniversity(MedicineEdition) 小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备 徐丽华,严金川,伍超,逯朝阳,王中群,袁伟 (江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001) smoothmuscle [摘要] 目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular cells,VSMCs)原代培养方 法及体外钙化模型。方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧光染色法鉴定后,将细胞随机分为对照 组和钙化组。采用yonkossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量。结果:培养3—5d时,可见细胞从组织块边缘爬 出,7~10d后细胞融合成片;免疫荧光染色显示胞质表达特异性仅一肌动蛋白;VSMCs培养至第2代细胞纯度达95%; 与对照组相比,钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性明显增加(P均0.05)。结论:改良的组织贴块法可获 得高纯度的小鼠VSMCs;3-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化。 [关键词]血管平滑肌细胞;原代培养;钙化 [中图分类号]R543 [文献标志码]A [文章编号】 1671—7783(2014)02—0u0—04 DOI:10.13312/j.issn.1671-7783.y130262 of Amodifiedmethodfor cultureandcalcification primary aorticvascularsmoothmusclecellofmouse XU Wei Li—hua,YANfin—chuan,形UChao,LUZhao一弘昭,WANGZhong—qun,YUAN of of Cardiology,AffiliatedHospitalJiangsuUniversity,ZhenjiangJiangsu212001,China) (Department for cultureofmouseaortic establisha andefficientmethod [Abstract]Objective:Tosimple primary calcificationmodelin VSMCs vascularsmoothmusclecellsf VSMCs)and vitro.Methods:The primary modified inoculationandidentified established Wereharvested by tissue—piece byimmunocytochemistry.The were divided

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