健步通络熏蒸液对兔膝骨性关节炎关节软骨影响的实验研究-中医骨伤科学专业论文.docxVIP

健步通 健步通络熏蒸液对兔膝骨性关节炎关节软骨影响的实验研究 PAGE PAGE 10 摘要 目的：本研究旨在观察健步通络熏蒸液对兔膝骨性关节炎关节软骨丝裂原活化蛋白 激酶（Mitogen-activated protein kinases，MAPKs）信号通路中p38MAPK，c-Jun氨基末 端激酶(JNK)及细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）表达的影响，探讨健步通络熏蒸液对 骨关节炎关节软骨的保护作用。 方法：4～6月龄新西兰大白兔26只，雌雄各半，按随机数字表法随机抽取6只作为 空白组，余20只采用改良 Hulth 法行骨关节炎造模，术后4周随机选取2只行空气栓塞致 死，取其关节软骨行HE染色，并于显微镜下观察，以验证造模是否成功，其余18只按 随机数字表法随机分为模型组，熏洗组和降钙素组，分笼饲养。连续干预20天后行空气 栓塞致死，取各组兔关节软骨，观察其大体形态学改变，并于显微镜下观察其病理变化， 并采用PCR技术检测软骨中ERK-1/2、p38MAPK及JNK的含量的变化。 结果：（1）大体形态观察：空白组关节软骨外观、颜色正常，软骨表面光滑无关节 面溃疡及软骨下骨质暴露；模型组可见关节面粗糙不平，颜色偏暗，软骨缺损并可见关 节边缘有大量骨赘形成；降钙素组和熏洗组，软骨表面欠光滑，个别区域颜色偏暗，可 见少量骨赘。 （2）HE染色：参照Mankins评分标准进行比较，模型组与空白组相比，模型组关 节软骨结构、关节软骨细胞及潮线差异显著，有统计学意义（P0.05），可见改良Hulth 法 造模成功。熏洗组和降钙素组关节软骨损害程度较空白组重，而较模型组轻，可见熏洗 组和降钙素组能够减轻对兔骨关节炎关节软骨的损害，保护关节软骨，二者比较差异无 统计学意义（P0.05）。 （3）PCR检测：与空白组相比，其余组p38、ERK1/2及JNK含量升高，差异有统 计学意义（P0.05）；与模型组相比，熏洗组与降钙素组的上述指标含量均降低，差异 有统计学意义（P0.05）；而熏洗组与降钙素组之间各指标含量的比较，差异无统计学 意义（P0.05）。 结论：（1）通过运用健步通络熏蒸液干预兔OA模型，发现健步通络熏蒸液可下调 p38、ERK1/2及JNK含量的表达，影响OA关节软骨的病理改变，保护关节软骨，延缓 OA病情的进展。 （2）通过本实验中熏洗组和降钙素组两组数据的比较，发现健步通络熏蒸液和降 钙素对OA有一定的治疗作用。 关键词：骨关节炎；关节软骨；健步通络熏蒸液；丝裂原活化蛋白激酶；p38MAPK； c-Jun氨基末端激酶；细胞外信号调节蛋白激酶 ABSTRACT Objective：To investigate the function of the Fluid of JianbuTongluo Fumigation on Mitogen-activated protein kinases which includes p38MAPK，c-Jun and ERK in articular cartilage of Rabbits knee osteoarthritis，and discuss the effect of the Fluid of JianbuTongluo Fumigation on articular cartilage. Methods：4～6months twenty six New Zealand white rabbits were chose, half male and half female. Six rabbits of them were randomly selected as blank group, and the twenty of them were made into knee osteoarthritis by modified Hulth method. After four weeks, the two of them were randomly chose to verify that the mold was successful by hematoxylin-eosin staining and pathological changes through microscope. Then eighteen rabbits were randomly divided into model group, fumigation group and calcitonin group. The rabbits in Fumigation group were fumigated with the fluid of JianbuTongluo fumigation