基于MDCK的葛根素跨膜转运机制的研究药剂学专业论文.docxVIP

安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 值（Rcell monolayer） 22 2.2.4.2.2 确定单位面积的电阻值（Unit Area Resistance） 22 2.3. 实验结果23 MDCK 形态学检查 23 TEER 的测量结果 25 第三部分 不同条件下葛根素的跨膜转运实验25 3.1. 实验材料26 3.1.1 细胞株26 3.1.2 材料、试剂与仪器26 3.2. 不同条件下 puer 在 MDCK 模型上的跨膜转运实验 26 HYPERLINK \l _TOC_250005 3.2.1 不同浓度 Puer 在 MDCK 模型上吸收研究（A→B） 27 HYPERLINK \l _TOC_250004 3.2.2 80μg/ml Puer 在 MDCK 模型上的分泌研究（B→A） 28 HYPERLINK \l _TOC_250003 3.2.3 80 μg/ml Puer 在 4℃下的吸收和分泌 28 3.2.4 P-gp 抑制剂 Ver 对 80 μg?mL-1 的 Puer 跨膜吸收的影响 ...28 3.3. 实验结果29 HYPERLINK \l _TOC_250002 3.3.1 不同浓度 puer 在 MDCK 模型上的吸收研究（A→B） 29 HYPERLINK \l _TOC_250001 3.3.2 80μg/ml puer 在 MDCK 模型上的分泌研究（B→A） 30 HYPERLINK \l _TOC_250000 3.3.3 80μg/ml puer 在 4℃下的吸收和分泌 32 3.3.4 P-gp 抑制剂 Ver 对 80 μg?mL-1 的 Puer 跨膜吸收的影响 ...35 3.4. 讨论37 小结39 附 录40 1. 个人简历40 2. 攻读硕士学位期间发表的学术论文40 致 谢41 综 述43 PAGE PAGE 1 英 文 缩 略 词 Abbreviation 英文缩写 英文全名 中文全名 ATCC American Type Culture Collection 美国模式培养物寄存库 Hanks(HBSS) Hanks′s balanced Salt Solution Hanks 溶液 HEPES N-2-hydroxyethylpiperrazine-N′-2-ethanesulfonic acid 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 HPLC high performance liquid chromatography 高效液相色谱 mM mmol · L-1 微摩尔每升 Papp apparent Permeability Coefficients 表观渗透系数 P-gp P-glycoprotein P-糖蛋白 Puer puerarin 葛根素 rpm revolutions per minute 转每分钟 TEER The Transport Epithelial Electrical Resistance 跨膜电阻值 Ver verapamil 维拉帕米 基于 MDCK 的葛根素跨膜转运机制的研究 研究生 孔一帆 导 师 李俊 教授 （安徽医科大学药学院，合肥，230032） 中文摘要 MDCK（Madin-Darby Canine Kidney）是马丁达比犬的肾近区小管上皮细胞， 它和 Caco-2 是目前应用于体外跨膜转运研究的两个最主要的单层细胞模型。和 Caco-2 一样，MDCK 接种在半透膜上之后能分化成柱状单层上皮并形成致密的 连接。此外，MDCK 还具有生长快和细胞亚型少的优势，这使得实验周期能够 大大缩短并且实验结果重现性较高。P-gp（P-糖蛋白，P-glycoprotein）广泛存在 于人体各组织细胞中，可能量依赖性的将细胞内药物泵出到细胞外，导致药物透 膜吸收减少，血药浓度降低。维拉帕米（verapamil）是 P-gp 的常用抑制剂。 葛根素（Puerarin），又名普乐林，是从中国传统中药葛根中提取出的一种异 黄酮类化合物，是中药葛根的主要活性成分。葛根素具有多种而复杂的药理作用， 比如降血压、降血脂、降血糖、抑制血小板聚集、抗氧化、抗炎、抗心律失常、 舒张心脑血管和神经保护作用等。葛根素的药理作用明确，资源丰富，价格低廉， 临床应用前景广阔。葛根素的口服利用度比较低，现在对于葛根素的药剂学研究 重点方向是提高其生物利用度。 本实验的目的是建立 MDCK 单层模型和葛根素的 HPLC 测定方法，分析了 浓度、方向、温度和 P-gp 抑制剂维拉帕米（verapamil）对葛根素跨膜转运过程 的影响，对于提高葛根素的口服生物