动物源性食品中仪一玉米赤霉醇残留-中华预防医学杂志.PDF

空堡亟堕医堂盘查!Q盟生!月筮!!鲞筮堡翅g垡!』堕!丛盟：』!!z!螋!：y!!!!：盟!：! ．检验技术． 动物源性食品中仪一玉米赤霉醇残留 检测方法的研究 白云峰顾鸣魏万贵王莉 朱坚龚毅 BALB／c小鼠腹腔制备腹水。饱和硫酸铵盐析法纯 仅一玉米赤霉醇(仪．zearalanol，仪一zER)又名右环 十四酮酚，是玉米赤霉菌在生长过程中产生的次生 化，获得特异性抗体。 代谢产物玉米赤霉烯酮的还原产物。作为外源性激 素，低浓度的仅一zER可促进蛋白质的合成，曾作为 N一羟基琥珀酸亚胺法制备仪．zER-HRPf4J，将lmg 促生长剂广泛使用¨J。但家畜饲养中使用仪一zER， 仅一zER衍生物溶解于0．3mL二甲基甲酰胺，依次加 可在动物肝、肾等组织中积累，同样药物残留可以随 入2mgN．羟基琥珀酸亚胺，2mgDCC，室温搅拌过 着食物链进人人体或通过动物的排泄物污染环境， m1 O．2moL／ 夜，离心，取O．1ml上清液，加入1 pH8 对人体健康和自然环境产生危害与长远影响。仪一 LPBs溶液(含2 zER已被列入我国兽药残留监控计划的重点品0．5h，4℃过夜，用SephadexG25柱纯化，收集第1 种心J。2002年，我国农业部明令禁止将ol—zER用作 个峰，浓缩，一20℃保存。 食用动物的促生长剂，所有可食组织中不得检出。 我们旨在建立单克隆抗体基础上的ELISA检测方 IgG包被量的确定：配制为200m∥L、150m∥L、108 法，研制动物源性食品中d—zER残留的快速检测试mg／L、36mg／L、12 剂盒。 000单抗腹 斗L／孔包板，置4℃过夜。洗板，加1：40 水，37℃反应lh。洗板，加1：4000酶标记抗原仅一 材料与方法 zER-HRP，37℃反应1h，显色，以A。，onm值大约1．0 1．材料与仪器：旺一zER、玉米赤霉烯酮的羊抗鼠IgG包板浓度为最适包板浓度。(2)以方 (ze删ezone)、碳二亚胺(EDC)、辣根过氧化物酶 阵法确定单抗工作浓度和酶标记抗原(仅一zER- (HRP)、N．羟基琥珀酸亚胺(N—hydroxysuccinirnide)、均 为美国Si舯a公司；N，N一二环乙基碳二亚胺(DCC， 不同稀释度的单抗loo斗L／孔，37℃反应1h。洗板 Al“ch公司)；吡啶、盐酸羧甲基羟胺 (carboxymethoxylamine，瑞士F1uka公司)；p一葡萄糖 接竞争结合抗体，当d—zER浓度为0斗∥L所获得 醛酸糖苷酶(B．glucuronidase，Merck公司)。BALB／ 的A。‰。值为1．0～1．5时，即为单抗最适工作浓度 c小鼠(中国科学院上海实验动物中心)；Sp2／O细 胞(本公司提供)。C18柱(德国RIDA公司)。 检测标准点的设置：参照欧美等国对进口动物源性 2．单抗的制备：结合0．羧甲基羟胺法和EDc 食品中残留限量标准和我国国