利用玉米芯水解液产苹果酸的戴尔根霉突变菌株选育及代谢-食品科学.PDF

90 2015, Vol.36, No.15 食品科学 ※生物工程 利用玉米芯水解液产苹果酸的戴尔根霉 突变菌株选育及代谢分析 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1,* 孙 婷 ，杨 英 ，王华林 ，汪海涛 ，吴学凤 ，张 旻 ，陈小举 ，潘丽军 ，姜绍通 ，李兴江 （1.合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽 合肥 230009 ；2.安徽建筑大学环境与能源工程学院，安徽 合肥 230601 ） 摘  要：诱变筛选发酵玉米芯水解液高产苹果酸的根霉属菌株，并对其进行代谢分析，研究其高产苹果酸的机 ITS X 理。对分离得到的菌株进行 序列鉴定，进一步利用软 射线辐射对菌种进行诱变筛选、对出发菌株和突变菌株 X 的相关酶活力进行测定及代谢通量分析。利用软 射线辐射结合丙烯醇平板筛选乙醇脱氢酶缺陷型菌株，得到突变 -1 3 TAA X 株 ，发现其乙醇脱氢酶基因的 处密码子突变为“ ”，阻断了突变菌株的乙醇代谢途径。进而利用软 射线 -2 辐射结合氟乙酸平板筛选乙醛酸循环缺陷型菌株，得到复合突变株 ，降低了副产物富马酸及琥珀酸的产量。复合 -2 -6- NADP H 突变株 的葡萄糖 磷酸脱氢酶中几处 （ ）结合位点发生突变，增加了糖酵解和磷酸戊糖两种途径的相互 -2 作用，促进了其戊糖代谢。经过两步分离筛选，得到的复合突变株 能发酵玉米芯水解液高产苹果酸，且减少了 -2 71% 副产物乙醇、富马酸、琥珀酸的生成。复合突变株 的苹果酸产量占代谢物总产量的比例由出发菌株的 增加到 91% 1 ，苹果酸产量增大 倍，研究成果对工业化利用突变菌株生产苹果酸具有重要意义。 关键词：苹果酸；玉米芯水解液；代谢通量分析；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 Mutation and Metabolism Analysis for a Malic Acid-Producing Rhizopus delemar Strain Utilizing Corn Cob Hydrolysate 1 2 1 1 1 1 1 1 SUN Ting , YANG Ying , WANG Hualin , WANG Haitao , WU Xuefeng , ZHANG Min , CHEN Xiaoju , PA