生物化学简明教程--第6章-酶.pptVIP

酶工程 酶工程：研究酶的生产和应用的学科，包括酶的原理、化学工程技术和基因重组技术的研究。 化学酶工程：酶的制备、修饰和固定化 6.10酶的研究方法与酶工程 食品行业：淀粉酶用于葡萄糖和果糖生产、溶菌酶用于食品保鲜、脂肪酶脂肪乳化提高口感、果胶酶用于果蔬饮料生产。 轻工业：淀粉酶、纤维素酶用于发酵原料处理，纤维素酶、半纤维素用于造纸行业。脂肪酶和纤维素酶在纺织行业中应用。 酶的应用 6.10酶的研究方法与酶工程 2、可逆抑制作用 （1）竞争性抑制作用 E+I EI 6.7酶促反应速率的影响因素 EI 非共价结合，可以通过透析、超滤等方法去除 例: 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用 抑制剂的结构与某种底物的结构类似 6.7酶促反应速率的影响因素 竞争性抑制作用动力学方程 EI+S → no reaction 推导出的方程 6.7酶促反应速率的影响因素 竞争性抑制作用动力学方程的特征 当[ I ]→0时，方程还原成米氏方程。 当[ I ]→∞时， 1/2Vmax 6.7酶促反应速率的影响因素 竞争抑制作用特点： 1 抑制剂与底物在结构上有类似之处; 2 可能结合在底物所结合的位点（如结合基团）上，从而阻断了底物和酶的结合; 3 Km值增加，降低酶和底物的亲和力 ，Vmax值不变。 6.7酶促反应速率的影响因素 （2）非竞争性抑制: （2）非竞争性抑制 6.7酶促反应速率的影响因素 非竞争性抑制作用动力学方程特征 当[I]→0 [I]→∞ 6.7酶促反应速率的影响因素 ⑴?非竞争性抑制剂的化学结构与底物的分子结构不相似； ⑵ 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合； ⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响； ⑷ 动力学参数：Km值不变，Vm值降低。 非竞争性抑制作用动力学方程特征 6.7酶促反应速率的影响因素 （3）反竞争性抑制 6.7酶促反应速率的影响因素 反竞争性抑制作用动力学方程特征 6.7酶促反应速率的影响因素 1.这种抑制作用使得Vmax，Km都变小，但Vmax/Km比值不变。 2.抑制剂不能与游离酶相结合，而只能与络合物ES相结合生成ESI络合物 6.7酶促反应速率的影响因素 温度对酶反应速度的影响 6.7酶促反应速率的影响因素 不同的酶具有不同的最适温度 酶催化不同底物是也具有不同的最适温度 6.7酶促反应速率的影响因素 pH对酶反应速度的影响 最适pH pH影响反应速度的原因 ( 1 )过高、过低的pH导致酶蛋白变性； ( 2 ) pH影响了酶分子中催化、结合或必需基团的解离 （3）pH影响底物分子和ES复合物的 解离状态。 6.7酶促反应速率的影响因素 激活剂对酶反应速度的影响 酶的激活剂：能提高酶活力的物质 无机离子 金属离子，如Na+、K+、Mg2+、Ca2+、 Cu2+、Zn2+、Fe2+等。 阴离子：如Cl-、Br-、I-、CN- 等 6.7酶促反应速率的影响因素 酶活性调节方式： 调节酶的数量和分布 调节酶的结构： 别构调控、可逆共价修饰和酶原激活 6.8酶活性调节 1.酶的别构调控： 酶具有活性部位和调节部位，调节部位能够与某些基团发生可逆的非共价结合，使酶的结构发生变化，进而改变催化活性。 别构酶： 具有别构调控作用 有多亚基 活性中心和别构中心 6.8酶活性调节 效应物： 对酶分子具有别构调节作用的化合物 正效应物和负效应物 +ATP - CTP 别构酶的Ｓ形曲线 [S] V 1/2Vmax--------------------------------------------- 大肠杆菌天冬氨酸转氨甲酰酶 6.8酶活性调节 2、可逆的共价修饰调节 可逆的共价修饰方式： 可逆磷酸化(phosphorylation) 可逆腺苷酰化(adenylylation) 尿苷酰化(uridylylation) 甲基化(methylation) 6.8酶活性调节 可逆的共价修饰调节：某些酶在其他酶的催化下，肽链基团发生可逆的共价修饰作用。 可逆磷酸化(phosphorylation) 6.8酶活性调节 Ser ATP ADP 糖原磷酸化酶 磷酸化酶b (活性低) 磷酸化酶a (活性高) 糖原磷酸化酶b 糖原磷酸化酶a 磷酸化酶激酶 2ATP 2ADP 磷酸化酶磷酸酶 2Pi 2H2O 6.8酶活性调节 3.酶原的激活 胃蛋白酶原(pepsinogen) 胰蛋白酶原(trypsinogen) 胰凝乳蛋白酶原(chymotrypsinogen) 酶原(zymogen)： 不具催化活性的酶的前体 酶原的激活： 某种物质