分子生物学第四章.pptVIP

分子生物学基础 第四章 遗传信息的转录—从DNA到RNA 第一节 RNA转录的概述 一、RNA转录的特点 在DNA指导下RNA的合成称为转录。RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点，并在特定的终点终止，此转录区域称为转录单位。一个转录单位可以是一个基因或多个基因。 第一节 RNA转录的概述 基因的转录是一种有选择性的过程，随着细胞的不同生长发育阶段和细胞内外条件的改变将转录不同的基因。转录起始主要由DNA分子上的启动子控制，而控制终止的部位称为终止子。 第一节 RNA转录的概述 分子杂交实验表明，合成的RNA只与模板DNA形成杂交体，而与其他DNA不能形成杂交体。说明反应产物RNA是在作为模板的DNA上由碱基配对机制合成的。 第一节 RNA转录的概述 第一节 RNA转录的概述 在体外，RNA聚合酶能使DNA的两条链发生转录，但在体内DNA的两条链中仅有一条链可用于转录，或是某些区域以这条链转录，另一些区域以另一条链转录。用于转录的链称为模板链，或负链（—链），又称为反义链；对应的链为编码链，即正链（+链），又称为有义链。编码链与转录出的RNA链碱基序列一致（极性一致），只是以U取代了T，它无转录功能。 第一节 RNA转录的概述 在RNA聚合酶催化的反应中，天然（双链）DNA作为模板比变性（单链）DNA更为有效。说明RNA聚合酶对模板的利用与DNA聚合酶不同。 在DNA复制时，首先需要将两条链解开才能将它们作为模板合成各自的互补链；转录时无需将DNA双链完全解开，而是局部解链，以其中一条链为有效模板合成。DNA经转录后仍以全保留方式保持双螺旋结构，而已合成的RNA链则脱离DNA链。 第一节 RNA转录的概述 二、转录的基本过程 无论是原核还是真核细胞，转录的基本过程都包括：模板识别、转录起始、通过启动子及转录的延伸和终止。 第一节 RNA转录的概述 第一节 RNA转录的概述 1．模板识别 模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 转录起始前，启动子附近的DNA链分开形成转录泡以促使底物核糖核苷酸与模板DNA的碱基配对。转录起始就是RNA链上第一个磷酸二脂键的产生。 第一节 RNA转录的概述 第一节 RNA转录的概述 2．转录起始 转录的起始从化学过程来看是单个核苷酸与开链启动子–酶复合物相结合构成新生RNA的5′端，再以磷酸二酯键的形式与第二个核苷酸相结合，起始的终止反应在σ因子的释放。 只有当新生RNA链达到6~9个核苷酸时才能形成稳定的酶–DNA–RNA三元复合物，才释放σ因子，转录进入延伸期。 第一节 RNA转录的概述 3．通过启动子 转录起始后直到形成9个核苷酸短链是通过启动子阶段，此时RNA聚合酶一直处于启动子区，新生的RNA链与DNA模板链的结合不够牢固，很容易从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。 一旦RNA聚合酶成功地合成9个以上核苷酸并离开启动子区，转录就进入正常的延伸阶段。 第一节 RNA转录的概述 4．转录延伸 RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并使新生RNA链不断伸长的过程就是转录的延伸。 随着RNA聚合酶的移动，DNA双螺旋持续解开，暴露出新的单链DNA模板，新生RNA链的3末端不断延伸，在解链区形成RNA–DNA杂合物。而在解链区的后面，DNA模板链与其原先配对的非模板链重新结合成为双螺旋。 第一节 RNA转录的概述 5．转录终止 当RNA链延伸到转录终止位点时，RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯键，RNA–DNA杂合物分离，转录泡瓦解，DNA恢复成双链状态，而RNA聚合酶和RNA链都被从模板上释放出来，这就是转录的终止。 第一节 RNA转录的概述 第一节 RNA转录的概述 第一节 RNA转录的概述 真核细胞中模板的识别与原核细胞有所不同。真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动子区，所以，需要一些被称为转录调控因子