氯霉素驱动的β-半乳糖苷酶互补体系的构建-中国食品卫生杂志.PDF

- ——— — 4 8 1— 氯霉素驱动的 β 半乳糖苷酶互补体系的构建 李黄金 陈 伟 赵 林等 论著 - 氯霉素驱动的 β 半乳糖苷酶互补体系的构建 李黄金 陈 伟 赵 林 邱映丽 赖琼英 林冬霞 郭志云 ( ， 5 10006 ) 广东药学院生命科学与生物制药学院 广东 广州 摘 要: - (-gal) ， 目的 构建氯霉素驱动的 β 半乳糖苷酶 β 互补体系 以期建立氯霉素残留检测用非竞争性均相酶 (OS-ECIA)。 DH5 BL2 1 -gal ， 互补免疫分析系统 方法 从大肠杆菌 α 和 株分别克隆 β Δα 和 Δω 基因 采用重叠延伸 PCR ， T7 ， 组装含抗氯霉素抗体可变区的互补肽融合蛋白 在 启动子驱动下于大肠杆菌宿主株中表达 表达产物纯化 。 V - V - ， 与复性后进行酶互补活性分析 结果 成功克隆和高效表达融合肽基因 H -CA P Δα 和 L -CA P Δω 表达产物为包涵 ， ， 。 体蛋白 经纯化和复性后呈现特征性酶学互补活性 且酶活性呈现氯霉素依赖性增加 结论 成功构建氯霉素驱 动的 β-gal 互补体系。 关键词: ; ;- ; ; 氯霉素 抗体可变区 β 半乳糖苷酶 互补肽 均相免疫分析 中图分类号:Q8 1 文献标识码:A 文章编号:1004 -8456 (20 10 )06 -048 1-05 Construction of Chloramphenicol-driven β-galactosidase Complementation LI Huang-jin ，CHEN Wei ，ZHAO Lin ，QIU Ying-li ，LAI Qiong-ying ，LIN Dong-xia ，GUO Zhi-yun (College of Life Science and Biopharmaceuticals ，Guangdong Pharmaceuticals University ， Guangdong Guangzhou 5 10006 ，China ) Abstract : Obj ective To establish a noncompetitive and homogeneous immunoassay for chloramphenicol based on the antigen-dependent reassociation of antibody variable fragmen