知母盐炙前后体外降血糖作用的研究.PDF

现代药物与临床 Drugs Clinic 第 31 卷 第 12 期 2016 年 12 月 ·1883 · 知母盐炙前后体外降血糖作用的研究 张 爽，高 雁，王晓婷，孙冬月，高 慧* 辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600 摘 要：目的 利用 Caco-2 细胞模型比较知母盐炙前后的降血糖作用，并考察其作用机制，为盐知母炮制原理的阐明提供 依据。方法 建立 Caco-2 单层细胞模型，采用 CCK-8 细胞活力试剂盒检测 5 000、2 500 、500、250 、50、25 、5、2.5 、0.5、 0.25 μg/mL 生、盐知母水煎液细胞毒性，来确定药物最大毒性剂量。以蔗糖酶和麦芽糖酶底物，葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖 质量浓度，计算抑制率，比较其对 Caco-2 单层细胞上蔗糖酶和麦芽糖酶活力的影响。葡萄糖吸收实验测定剩余葡萄糖的质 量浓度，比较生、盐知母对 Caco-2 细胞吸收和转运葡萄糖的影响。结果 当生、盐知母质量浓度≤250 μg/mL 时，Caco-2 细胞可进行细胞实验。实验选取了 50、250 μg/mL 两个质量浓度。生、盐知母水煎液 50、250 μg/mL 对蔗糖酶、麦芽糖酶活 性均有抑制作用，且盐知母水煎液对蔗糖酶、麦芽糖酶的抑制作用均优于生知母。生、盐知母水煎液均有降低细胞对葡萄糖 吸收的趋势，且呈现剂量相关性，但效果不显著。盐知母水煎液对葡萄糖吸收的抑制作用略好于生知母 （P ＜0.05 ）。结论 盐 知母对 Caco-2 细胞的降糖作用优于生知母，其降糖机制可能主要体现在 α-葡萄糖苷酶上，而对葡萄糖吸收作用影响较小。 关键词：生知母；盐知母；Caco-2 细胞；蔗糖酶；麦芽糖酶；葡萄糖吸收 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1674 - 5515(2016)12 - 1883 - 04 DOI: 10.7501/j.issn.1674-5515.2016.12.003 Hypoglycemic effects in vitro of Anemarrhena Rhizoma before and after processed with salt-water ZHANG Shuang, GAO Yan, WANG Xiao-ting, SUN Dong-yue, GAO Hui College of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China Abstract: Objective To compare the hypoglycemic effects of Anemarrhena Rhizoma before and after processed with salt-water by Caco-2 cell model, and explore its mechanism, so as to provide reference for explain the processing principle of Anemarrhena Rhizoma . Methods Caco-2 cell models were established. Cytotoxicitits of Anemarrhena Rhizoma and salt Anemarrhena Rhizoma with concentrations of 5 000, 2 500, 500, 250, 50, 25, 5, 2.5, 0.5, and 0.25 μg/mL were determined with CCK-8 cell viability kit, and obtained the maximum toxic dose. The GOP-POD method was used to determine the concentration of sucrose and maltase activity, and to calculate the inhibition rate, and the effects of Caco-2 on