绞股蓝HPLC指纹图谱的研究-西北大学学报编辑部.DOC

PAGE PAGE 7 西北大学学报(自然科学网络版) 2003年8月 第2期 Science Journal of Northwest University Online Aug. 2003 No. 2 ________________________ 收稿日期：2003-04--03 基金项目：国家自然科学基金项目;教育部科学技术研究重点资助项目（02187）;高等学校骨干教师资助项目（GG-150-71006-2877）;陕西省教育厅专项科研基金资助项目（01JK076） 特约稿天麻药材的色谱指纹图谱 特约稿 郑建斌，吴少平 (西北大学 分析科学研究所, 陕西 西安 710069) 摘 要：采用高效液相色谱法建立了测定天麻中主要活性成分含量的方法，并通过对不同产地天麻中主要活性成分相对保留时间和相似度的计算获得其色谱指纹图谱。实验结果表明：不同产地天麻的液相指纹图谱中峰个数及形状无明显差别，但作为天麻药材的指标性成分天麻素含量以陕西安康、洛南、丹凤和四川产天麻中的较高。该研究可为天麻药材GAP生产基地的建立提供依据，对天麻药材资源的开发、利用有着重要的意义。 关 键 词：高效液相色谱法；指纹图谱；天麻 中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1000-274X(2003)0009-07 天麻（Gastrodia elata Blume）又名赤箭，属兰科（Orchidaceae）非自养型植物，由于没有根和绿叶，不能进行光合作用而自养。天麻主要产于陕西、云南、四川及贵州等地，药用其干燥块茎，可治疗高血压、头昏、眩晕、肢体麻木等症，对老年性痴呆症有较好的预防和治疗作用。药理试验表明，其主要活性成分天麻素（对羟基苯甲醇-β-D-葡萄吡喃糖甙）具有镇定、安眠、镇痛和改善心肌缺血等作用，且毒副作用小[1]。王震等[2,3]采用显微鉴别、理化鉴别方法并结合天麻的性状对天麻及其伪品进行了鉴别；王跃生等[4～9]对天麻药材中的有效成分进行了研究。药材产地不同，其化学成分的积累不同，则药效和药性也不尽相同。本文收集了不同产地、不同性状的天麻样品，建立了RP-HPLC梯度洗脱分析方法，并对其主要活性成分的含量进行了测定，同时研究了天麻药材的液相色谱指纹图谱。 1 实验部分 1.1 仪器、试剂与材料 HP1100高效液相色谱系统，二极管阵列检测器（美国安捷伦公司），DL-180型超声清洗器（浙江省象山县石浦天电子仪器厂），Milli-QG超纯水制备仪(美国Millipore公司)，植物试样粉碎机（河北省振兴电器厂）。 天麻药材样品购自陕西省药材公司（见表1）；天麻素对照品（由北京药品研究所提供）；对羟基苯甲酸（分析纯）；对羟基苯甲醛（分析纯）。甲醇，AR级（Fisher Scientific UK Limited生产），所用水为超纯水。 1.2 供试品溶液的制备 将各天麻样品粉碎、过筛后，均准确称取其粉末约1.0 g，置于50 mL烧杯中，加入10 mL 70%甲醇静置过夜，然后将这些样品分别经超声提取30 min后过滤于50 mL容量瓶中。每个样品均按照以上操作超声提取，共过滤3次并将所得滤液均置于50 mL容量瓶中，用70%甲醇定容至刻度。分别取适量上述滤液，用0.45μm针头过滤器滤过，即得样品溶液。 1.3 对照品溶液的制备 准确称取一定量天麻素、对羟基苯甲醛、对羟基苯甲酸对照品置于50 mL容量瓶中，加入70%甲醇超声溶解后，用70%甲醇稀释至刻度，振荡摇匀，配成浓度分别为0.073 2，0.082 8，0.084 9 mg/mL的混合溶液。取适量用0.45μm针头过滤器滤过，即得对照品溶液。 表1 天麻药材 Tab.1 Gastrodia elata Blume medicine 样品编号 产 地 性 状 备 注 1 2 3 4 5 6 7 8 贵州省 陕西汉中 陕西安康 陕西商州 陕西洛南 四川省 东北 陕西丹凤 切片 块状 块状 块状 块状 块状 块状 切片 姜汁炮制 原药 原药 原药 原药 原药 原药 原药 1.4 色谱条件 ZORBAX SB-C18（150 mm×4.6 mm，3.5 μm）色谱柱(德国)。流动相：A为水（含0.02 mol/L KH2PO4），B为甲醇溶液。梯度洗脱程序：0 min，A﹕B (100%﹕0%)；40 min，A﹕B (60%﹕40%)；60 min，A﹕B (50%﹕50%)；流速为1.0 mL/min；检测波长为227.16 nm；柱温为20 ℃；进