葡萄高效再生体系的建立及转LEAFY基因的研究.PDF

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浙江大李李报(农业与生命科学版)27(5),523-526.2001 JournalofZhejiangUniversity(Agric趾 LifeSci.) 文童编号 ;1008-9209(200L05-0523-04 葡萄高效再生体系的建立及转LEAFY基因的研究 陈力耕,刘淑芳,胡西琴 (浙江大学 园艺系,浙江杭州310029) 摘 要:采用荀萄英段为外植体建立起高频再生体系,随后建立了农杆菌介导的葡蔺主裁品种玫瑰香 的越定遗传转化体系、获得了转基因桂株.将拐带拟南芥茱LEAFY基因的VDC202载体转化到农杆菌 菌株GV3103中,与茎段共培养3d后,在附加利福平的培养基GS+ZT(2.0mgr1.)t选择培养」周.0 压力选择培养初步筛选到转基因植株,且可以直接获得生根转化试管苗 从初步鉴定的转化植株上选取 健壮幼嫩的断叶作为材杆.捉取菊萄基因纽DNA.借助PCR,Southern杂交等分子生物学手段进一步 鉴定.结果表明LEAFY基因已成功整合到菊萄染色体DNA上.且转化颇率较高 关 甘 词:荀萄 LEAFY基因 过传转化效率 中圈分类号:S6036:S663.1 文献标识码 :A CHENLi-geng,LIUShu-fang.HUXi-gin(Dept.ofHDrt.,ZhejimrgLurx,Hangzhna310029.(h- 刀“) DevelopmentandstudiesonLEAFYgenetictransformationsystemwithhighefficiencyincommercial grape(VitisviniferaL.vacmuscat).journalofZhejiangUniversity(Agric.衣LifeSet.)、2001.27 (5)}523-526 Abstract:Transgenicplantsappeartobeanewwaytograpeimprovementandapowerfulmotfur studyinggenefunctions.Usingadirecthighfrequencyshootregeneration=yst,nisuitableforgenciL transformationwasestablished.successfullyinthisstudy.whichwasthebasefar山efolluwmgr-e-1, ofconstructionofadirecthighfrequencyshootregenerationsystemsuitableforgenetictransformation wasestablishedsuccessfullybyusingpiecesoffreshstemofMuscatofAlexandria(Vvt‘x)uferuL. vac.muscat)asexplants.andtransformedplantswereobtainedwithahighertransformationefhcien cy.Stempiecesfrom6rvitro-growplantswerecocultivatedfor3dayswithAgmbacteriuhniumefatiens strainGV3101containingthevectorpDC202inwhichLEAFYgenefrom

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