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未知病原体快速检测平台整体解决方案
背景:新发突发传染病是人类面临的一个重要威胁,人口的增长、迅速
的城市化、自然生态环境的改变、人和野生动物接触的机会增加、经济的全
球化、跨国旅行人口数量的激增、跨国旅行速度的加快以及抗生素的滥用等
大大增加了新发产染病的风险。根据 WHO 的研究报告,自 1967 年以来,至
少有 39 种新的病原体被发现,重要的包括艾滋病毒、埃博拉病毒、马尔堡病
毒 SARA 病毒、禽流感病毒和猪流感病毒等。而大部分传染病都会通过与人
类密切接触的家畜、家禽等中间宿主传播给人类,因而包括 SARS 病毒、流感
病毒、致病性细菌等病原体在内的动物疫病的预防控制显得尤为重要。新型
疾病正以前所未有的速度(平均每年新增一种)出现,并跨越国境在全世界
传播。新发传染病由于没有分析检测盒诊断治疗手段,加之人群普遍缺乏免
疫力,易造成重大社会影响。有些新发突发传染病可能造成重大的人员伤亡,
严重影响社会稳定和经济发展。2003 年 SARS 的流行给了我们很好的警示(亚
太国家的经济损失高达 600 亿美元)。因此加强重大疫病预防控制工作
中的重要新发突发传染病的快速检测能力建设对于国家安全和社
会民生均具有重要意义。
针对新发突发传染病病原体进行快速鉴定,在最短的时间内获取病原体
的信息,对于有效控制突发生物危害事件
具有重要的指导意义。病原微生物的快速
检测方法有很多种,包括基于抗原抗体的
免疫学方法和基于核酸检测的方法。这些
方法各有特点,而序列测定的方法是确定
微生物最为准确可靠的方法之一。传统的
序列测定方法耗时长、成本高、通量低,无
法满足对于未知病原的分析。由于未知病
原体的核酸序列未知,因此不能够采用PCR
技术进行扩增和测序。
杭州纽蓝科技有限公司
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近年来发展起来的高通量测序技术(NGS),则大大地拓展人
们对 新发传染病的检测手段,成为当前传染病研究的主流技术,
随着该技术的推广和应用,通过这种方法得到的基因序列也成指数形式增长,
极大的丰富了微生物数据库,这在未知病原体发现方面具有十分重要的意义。
l 传统检测技术简介:
以往要得到生物样本的基因序列都是通过一代测序(也称 Sanger 测序),
一次只能检测一段 500-800bp 的核酸序列,并且要求对病菌进行分离培养,对
未知病毒就毫无办法。一代测序方法需要设计特异性引物对样品进行扩增,无
法针对新物种或无参考区域的样品进行快速检测。
一代测序结果以峰图形式显示,对于低频突变难以分辨
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相比传统的测序方法,二代测序主要有以下优势:
(参考 .uk/news-
updates/news/2012/aug/ngs#.USXNTVphuUw )
(1) 高质量的病原体溯源;
(2) 分辨率更高,可以分辨从亚型突变角度分辨再次爆发与再次感染;
(3) 更深入地理解全球微生物种群结构,包括耐药性的获取、血清型的突
变;
(4) 速度上的优势,比如在医院里的一次 MRSA (耐药金黄色葡萄球菌)疫
情爆发案例,证实了 NGS 在 48 小时内可以确认爆发、找到被遗漏的传
播方式、查找突变型、耐药性、毒性基因等。
生物芯片技术是现今用得
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