甲状旁腺激素相关肽与糖尿病性骨质疏松性骨折的相关性研究-中西医结合外科学专业论文.docxVIP

学号：032007207硕士学位论文 学号：032007207 硕士学位论文 甲状旁腺激素相关肽与糖尿病性骨质疏 松性骨折的相关性研究 作者姓名 刘岸龙 申请学位级别 临床医学硕士学位 指导教师姓名 王银河 职 称 副主任医师 学科专业 中西医结合外科学 研究方向 骨质疏松 学习时间自2007年9月1日 起至2014年6月30日止 论文提交日期2014年4月3日 论文答辩日期2014年5月22日 学位授予单位 南京中医药大学 学位类型 临床医学专业硕士学位 万方数据 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或 撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标 明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者(需亲笔)签名：赳京移谭r月旷日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中医 药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 ／ 保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密酬 (请在以上方框内打“4”) 学位论文作者(需亲笔)签名：啪右’刈y年f月啪 导师(需亲笔)签名： 砂∽ 矧P年月盯日 万方数据 南京中医药大学硕士学位论文目 南京中医药大学硕士学位论文 目 录 摘要 iii Abstract． ． ． ． ． ． ． ． ．． ．．．． ． ． ．．iv 前言 ．1 第一部分理论研究 。3 1中医学认识 ．．3 1．1骨质疏松症 ． ．3 1．2糖尿病 ．4 1．3DM合并OP ．．5 2现代医学研究 一5 2．1定义、分类 ．5 2．2流行病学 。6 2．3机制及治疗 ．6 第二部分实验研究 ．8 1材料与方法 一8 1．1动物 一8 1．2骨折造模和PTHrP给药 8 1．3X线和CT研究 8 1．4固定脱钙 ．9 1．5 HE染色试验 9 1．6总胶原组织化学染色 11 1．7抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase TRAP)染色 。11 1．8碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)组织化学染色 1 2 1．9免疫组织化学染色 13 1．10蛋白印迹(Westem blot)试验 15 1．1l RT-PCR实验 ．20 1．12实时荧光定量RT-PCR实验 ．23 1．13电脑软件分析统计及统计学符号的标识 ．24 2实验结果 25 万方数据 目录2．1内源性瘦素受体基因缺失和外源性PTHrP给药对于骨折愈合的影响 目录 2．1内源性瘦素受体基因缺失和外源性PTHrP给药对于骨折愈合的影响 。25 2．2内源性Lepr基因缺失和外源性PTHrP给药对于软骨骨痂形成的影响 25 2．3内源性Lepr基因缺失和外源性PTHrP给药对于成骨骨形成的影响 25 2．4内源性Lepr基因缺失和外源性PTHrP给药对于成骨相关基因和蛋白表达的影 响 ．26 2．5内源性Lepr基因缺失和外源性PTHrP给药对于破骨骨吸收和相关基因表达的 影响 26 3讨论 27 第三部分临床研究 29 1目的 29 2方法 29 3结果和讨论 29 参考文献 31 综述 ．35 英文缩略词表 5 l 攻读硕士期间取得的学术成果 54 附 录 ．55 致{射 ．65 万方数据 南京中医药大学硕士学位论文摘要 南京中医药大学硕士学位论文 摘要 目的：了解甲状旁腺激素相关肽的研究历程、作用机制、有关实验和临床结果，明确外源 性PTHrP皮下注射是否能促进糖尿病模型鼠的骨折愈合及其调控作用，为甲状旁腺激素相 关肽在治疗糖尿病性骨质疏松性骨折的应用提供科学根据和临床指导。 方法：我们对12周龄的小鼠进行标准化股骨中段骨干骨折造模，包括瘦素受体基因敲除的 纯合子小鼠和野生型小鼠。将小鼠分为3组，分别为标准对照组，空白对照组和甲状旁腺 激素相关肽治疗组。在甲状旁腺激素相关肽给药2周后，我们对骨痂组织进行分析研究， 包括X线、微CT、免疫组织化学染色和分子生物学。 结果：三组小鼠全部造模成功并完成实验。在骨折2周后，与空白对照组相比，标准对照 组和甲状旁腺激素相关肽治疗组小鼠的软骨骨痂面积均出现不同程度的减少，但是总骨痂 面积和骨性骨痂面积均有增加(P0．05)。同时，成骨细胞数目、ALP阳性面积、I型