间歇性低温刺激对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块结构的影响分析-内科学专业论文.docxVIP

进搅医堂随亟±堂焦途室间歇性低温刺激对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块结构的 进搅医堂随亟±堂焦途室 间歇性低温刺激对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块结构的 影响 背景： 动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)在大于40岁的男性中发病率约为 66％，在大于40岁的女性中发病率约为50％。在临床上，其主要分为冠 状动脉粥样硬化、脑血管粥样硬化、外周血管粥样硬化等。冠状动脉粥样 硬化性心脏病(coronary heart disease，CAD)是严重影响人类生命健康的 疾病。据统计，大约60％的死亡由心血管疾病(cardiovascular disease，CVD) 造成。在我国，心血管病人的患病率处于持续上升阶段，据统计目前已达 2．3亿人次，也就是说平均每5个成年人中就有1人患有心血管疾病。全 国每年死于心血管疾病的患者多达350万。冠状动脉粥样硬化斑块分为稳 定斑块和易损斑块。据以往研究证实，急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)的发生主要是因为冠状动脉易损斑块的破裂所致，而易 损斑块的主要病理特征就是斑块表面的一层薄的纤维帽。基质金属蛋白酶 (Matrix metalloproteinase，MMP)可以降解细胞外基质，在AS斑块细胞外 基质的重构发挥重要作用，可诱导斑块破裂，诱发ACS。而基质金属蛋白酶 抑制剂(Tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP)是1VlNlPs的内 源性特异性抑制因子，对于／V11VIPs的活性抑制发挥重要作用。 据流行病学调查发现，冠心病的死亡事件与周围环境的温度密切相关， 随着周围环境温度的下降，急性冠脉综合征的发病率亦随之上升。在临床 工作中同样会发现，在严寒的冬天，各类心血管病的发病率及死亡率都会 上升。但是低温导致急性冠脉综合征发病率上升的具体机制尚不明确。于 进搅匡堂隧亟±堂僮途塞是我们提出这样一个假设：长期的低温刺激导致斑块的失稳与动脉粥样硬 进搅匡堂隧亟±堂僮途塞 是我们提出这样一个假设：长期的低温刺激导致斑块的失稳与动脉粥样硬 化斑块的纤维帽变薄有联系。 目的： 严寒的冬天与ACS的发生密切相关，但是其确切机制尚不清楚，为了 在严寒的冬天做好急性冠脉综合征的防治工作，本实验旨在探讨低温导致 急性冠脉综合征发病率上升的机制。 方法： 将20只8周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠(apolipoprotein E．deficient， ApoE乒)被随机分为对照组(n-lO)及实验组(n-10)，实验组ApoE基 因缺陷小鼠每天有4小时处于4±1℃环境中(每天8：oo到11：00)，其 余时间处于24±2℃环境中，对照组ApoE基因缺陷小鼠全天处于24±2℃ 环境中。经过8周的低温干预后，测定两组ApoE基因缺陷小鼠的以下指 标： 1)、采用电子称了解两组ApoE基因缺陷小鼠的体重情况； 2)、采用酶法及直接选择法测定两组APOE基因缺陷小鼠的空腹血 脂，包括甘油三酯(Total cholesterol，TG)、总胆固醇(Triglycerides，TG)， 低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein Cholesterol，LDL—C)、高密度 脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein Cholesterol，HDL—C)； 3)、使用罗氏血糖仪测定两组ApoE基因缺陷小鼠空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)； 4)、取ApoE基因缺陷的小鼠主动脉行Western Blot，了解小鼠主动 脉中MMP2／3／9／14，TIMPl／2的表达量； 5)、ApoE基因缺陷小鼠主动脉根部切片行HE染色比较两组小鼠动 脉粥样硬化斑块的大小； 6)、APOE基因缺陷小鼠主动脉根部切片行Masson染色比较两组小 塑趟匡堂睦亟±堂僮途塞鼠动脉粥样硬化斑块内胶原含量； 塑趟匡堂睦亟±堂僮途塞 鼠动脉粥样硬化斑块内胶原含量； 7)、两组ApoE基因缺陷小鼠主动脉根部行MOMA2、CD3、Q—SMA 免疫组化染色，比较两组小鼠主动脉根部动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞 (macrophagocyte)、淋巴细胞(1eukomonocyte)和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMC)的含量。 结果： 8周的低温干预后，两组ApoE基因缺陷小鼠间体重、血脂、血糖无 明显差异(胗O．05)。实验组ApoE基因缺陷小鼠主动脉根部动脉粥样硬化 斑块面积要大于对照组(氏O．01)。实验组ApoE基因缺陷小鼠主动脉根部 动脉粥样斑块内胶原及血管平滑肌细胞含量低于对照组，淋巴细胞及巨噬 细胞