建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究-心胸外科专业论文.docxVIP

中文摘要建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究 中文摘要 建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究 摘要 目的新生儿、小婴儿心外科的迅速发展为寻找合适的血管和瓣膜替代材料提出 了迫切要求，结合成人同种异体组织库的实际经验，初步建立大月龄胎儿血管和瓣膜 组织库，并通过形态学研究对建库方法、保存效果等进行评估。 方法同种异体材料取自脑死亡胎儿15例，胎龄28～40周。无菌条件下取材、 修剪制备，其中带瓣膜主动脉15条、带瓣膜肺动脉8条。先依次用冷冻保护液1号 液和冷冻保护液2号液浸泡，后放置于4C冰箱冷平衡，特制无菌冷冻袋包装。用液 氮蒸气梯度降温方法完成降温，．196C长期保存。复温前后光镜观察血管形态、扫描 电镜观察动脉和瓣膜内皮细胞完整情况、透射电镜观察细胞超微结构。 结果 一、血管及瓣膜修剪后和解冻后分别取样送细菌室做细菌和霉菌培养，结果均为 阴性。 二、光镜观察显示：解冻后的主动脉内皮下层、中膜平滑肌细胞、胶原纤维、弹 力纤维、外膜的基本结构与正常新鲜组织相同。中膜平滑肌细胞核固缩、浓 染，未见急性损坏样改变，可见局部粘液样变性以及部分内皮细胞脱落现象。 三、扫描电镜观察显示：解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落，内皮下层暴露。 四、透射电镜观察显示：解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落，胶原纤维和弹 力纤维形态结构正常，排列整齐，部分细胞线粒体结构及周围基质发生空泡 样改变。 结论 一、初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和主要技 术指标。 二、严格的无菌操作取代了影响组织活性的抗生素灭菌法，绁菌和霉菌培养结果 均为阴性。 三、改进的液氮蒸汽梯度降温法，较程序控制降温仪降温简单，冷冻效果更可靠。 四、光镜及电镜观察结果显示改良的冷冻保存方法保存大月龄胎儿血管和瓣膜组 织的效果良好。 五、为大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的完善、深入进行活性和免疫性研究以及下 一步的临床应用打下基础。 ．2． 中文摘要关键词胎儿；血管和瓣膜组织库；冷冻保存；光镜；电镜 中文摘要 关键词胎儿；血管和瓣膜组织库；冷冻保存；光镜；电镜 研究生：唐秀杰 导师：邢泉生教授 ESTABLISHM[ENT ESTABLISHM[ENT oF HoMOGRAFTS BANK oF VAIⅣED GREAT ARTERIES FROM LATE—PREGNANCY FETUS ABSTRACT objective With the rapid development of neonatal cardiac surgery,the request to finding suitable replacement material of heart valve and vascular homografts becomes more and more urgent．To establish homografts bank of valved great arteries from late-pregnancy fetus referring to the method of adult homografts bank and to explore the feasibility ofthe method by morphologic study． Methods The donor pool from which homografts are obtained is composed of healthy brain—dead fetuses whose gestational ages range from 28 to 40 weeks．These homografts are obtained，clipped under sterility including 15 aortas with valve and 8 pulmonary arteries with valve．Firstly they are soaked in cryoprotectant No．1 and No．2 sequently, then equilibrated in 4C refriger,packed in special freezing bags．Programmed reducing the temperature is finished by using gradient reducing the temperature ofliquid nitrogon vapor．The homograftes are preserved for a long term at-196。C．After thawing，vascular wall form is