建立定量乙酰化蛋白质组的质谱分析方法-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 南开大学学位论文使用授权书 本人完全了解《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》关于南开大学(简 称“学校”)研究生学位论文收藏和利用的管理规定，同意向南开大学提交本人的学位论文 电子版及相应的纸质本，并委托印刷存档论文。 本人了解南开大学拥有在《中华人民共和国著作权法》规定范围内的学位论文使用权， 同意在以下几方面向学校授权。即： 1.学校将学位论文编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》，并作为资料在学校 图书馆等场所提供阅览，在校园网上提供论文目录检索、文摘以及论文全文浏览、下载等 信息服务； 2.学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存学位论文；学校根据规定向教育部指 定的收藏和存档单位提交学位论文； 3.非公开学位论文在解密后的使用权同公开论文。 4.同意学校将本人向有关电子出版单位授权的学位论文(含电子版和授权书)转交相关 授权单位。 本人承诺：本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品，并已通过论文答 辩；提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致，如因不同造成不良后果由本人自负。 本人签署本授权书一份，交图书馆留存。 学位论文作者暨授权人(亲笔)签字： 张 勇 2015 年 5 月 20 日 南开大学研究生学位论文作者信息 论文题目 建立定量乙酰化蛋白质组的质谱分析方法 姓 名 张勇 学号 2120120999 答辩日期 20 15 年 5 月 20 日 论文类别 博士 □ 学历硕士 √ 专业学位硕士 □ 同等学力硕士 □ 划 √ 选 择 学院(单位) 生命科学学院 学科/专业(专业学位)名称 生物化学与分子生物学 联系电话 电子邮箱 HYPERLINK mailto:nankai1989@ nankai1989@ 通信地址(邮编)： 天津市经济技术开发区洞庭路 220 号 S705（300457） 非公开论文编号 备注 注：本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写一份并签字后交校图书馆，如已批准为非公开学 位论文，须附批准通过的《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》和“非公开学位论文标注说明”页。 摘要 摘要 摘要 人们已经发现包括甲基化、乙酰化、糖基化、磷酸化在内的超过 200 种不 同类型的蛋白质翻译后修饰（PTM），其中许多修饰的异常调节与细胞衰老和 疾病如癌症、心血管疾病等密切相关。研究它们的多样性对于理解疾病发生机 制乃至发现药物治疗靶点非常重要。尽管有证据阐明这些修饰的蛋白会影响细 胞功能，但是由于研究方法的限制，仍然还有大量修饰的底物和修饰位点是不 清楚的。因而对现有的研究方法不断改进和创新是十分有必要的。 乙酰化修饰是细胞生物调节蛋白质发挥生物学功能的重要翻译后修饰。大 量的研究发现，乙酰化在控制细胞代谢 HYPERLINK \l _bookmark49 [1]、蛋白折叠、姊妹染色单体的结合中 起着重要作用。还发现乙酰化具有调节热量限制的有利效果，即延缓衰老的不 用绝食的低营养摄入 HYPERLINK \l _bookmark50 [2]。研究也证明乙酰化的功能角色从酵母到哺乳动物都是 进化上保守的。 酿酒酵母是一种广泛应用于研究的模式生物，它含有一些进化上保守的赖 氨酸乙酰化转移酶和去乙酰化酶，因此非常适合作为乙酰化修饰的研究对象。 本研究不仅有助于发现乙酰化修饰在应激反应和代谢调控中扮演的角色，而且 还将有助于深入研究乙酰化修饰在诸如肿瘤等疾病发生发展中的重要作用，并 有助于发现新的药物治疗靶点以及研制抗肿瘤药物，如最近报道的 FDA 批准上 市的Ⅰ型组蛋白去乙酰化酶口服抑制剂西达苯胺 HYPERLINK \l _bookmark51 [3]。 本课题针对乙酰化修饰，优化了样品制备和数据分析流程，建立了基于酵 母体系的双甲基标记定量乙酰化蛋白质组的分析流程，总共鉴定到 362 个高度 可信的乙酰化蛋白以及 846 个乙酰化位点。并且在两个菌株定量比较中发现了 3 个显著差异表达的乙酰化蛋白和修饰位点，分别是 PAA1 的 K176，ENO1 的 K346，SSE2 的 K627。进一步的研究将有助于阐明这三个乙酰化位点在酵母体 内的功能。图 15 幅，表 4 个，参考文献 99 篇。 关键词：酿酒酵母；蛋白质组；赖氨酸乙酰化；双甲基标记；生物质谱 I Abstra Abstract Abstract There are more than 200 kinds of post-translational modifications (PTMs) have been found including methylation, acetylation, glycosylation and phospho