气相色谱法测定乙醇等4种溶剂的含量—内标法医学课件.pptVIP

DESIGNED BY WPS? * * * * 实验二 气相色谱法测定乙醇等4种溶剂的含量—内标法 * 1 实验目的 1.1 了解并掌握其相色谱法的分离原理 1.2 学习并掌握气相色谱仪的操作 1.3 学习并掌握内标法定量 1.4 学习使用VARIAN Star 6.0英文版色谱工作站并简单处理分析数据 * 2 实验原理和仪器结构 2.1 实验原理 在色谱分离中，组分在色谱柱上的保留程度取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数K，分配系数的差异是色谱法组分被分离开的依据。 * 慢 中等 快 色谱分离 Temporal course 淋洗液 * 2.2 仪器结构 1 高压气瓶（载气）；2 减压阀（氢气表或氧气表）；3 净化器；4 稳压表；5 压力表；6 进样器；7 汽化室；8 检测器；9 静电计；10 记录仪；11 模数转换器；12 数据处理系统；13 毛细管柱；14 尾吹气；15 柱恒温箱；16 针阀；17分流阀；18 吹扫气 毛细管气相色谱仪流程示意图 * 一般200-300℃ 一般60-100℃ 初始效应 冷却效应 （进样时间） 基质效应 * 吹扫：克服记忆效应 分流：防止过载 分流比：样品气化后放空的体积与进入色谱柱体积之比。 尾吹：克服检测器的死体积，使色谱峰形状尖锐。 毛细管气相色谱仪各气路的作用 * 蓝色谱图—为不分流 红色谱图—分流比10∶1 绿色谱图—分流比100∶1 不分流，溶剂会过载，分离的组分流出在溶剂的拖尾峰上，导致无法正确定量积分。 * 尾吹起的作用 红色线条的色谱图为关闭尾吹气 溶剂（甲醇） （乙醇） 丙酮（内标物） （二氯甲烷） （乙腈） （乙酸乙酯） * * 3 实验仪器设备、试剂、溶液和  实验用品 3.1 仪器 气相色谱仪：VARIAN CP-3800，氢火焰离子检 测器（FID），VARIAN Star 6.0英文版色谱工作站；BS 210S型电子分析天平；10 μL微量进样器。 3.2 试剂与样品 甲醇（99.5%）、乙醇（99.8%）：优级纯；丙酮 （99.5%）、二氯甲烷（99.0%）、乙腈（99.5%）、乙 酸乙酯（99.5%）：分析纯；试样。 * 3.3 溶液 约185 g/L 丙酮甲醇内标溶液；乙醇（约30 g/L）、二氯甲烷（约90 g/L）、乙腈（约40 g/L）、乙酸乙酯（约36 g/L）混合标准工作溶液；试样溶液。 3.4 实验用品 每小组按4人计，容量瓶：50 mL 2只（共用）、100 mL 1只（共用）；具塞刻度试管：10 mL 2支；移液管：2 mL 2支、5 mL 2支、10 mL 2支、25 mL 1支。 * 4 气相色谱仪的操作条件 色谱柱：AC 10（60 m×0.22 mm×0.25 μm）石英 毛细管柱； 汽化室：200 ℃；检测室：200 ℃； 柱温：60 ℃(保持1 min) 7 ℃/min 180 ℃；运行9 min后手动停止。 载气：普氮，柱前压：中间EFC 20 psi； 分流比：20?1； 进样量：1 ?L； 保留时间：乙醇：约7.4 min；丙酮（内标物）：约 7.7 min；二氯甲烷：约7.9 min；乙腈：约8.0min； 乙酸乙酯：约8.6 min。 * 5 实验步骤 5.1 内标溶液、混合标准工作溶液、试样溶液的配制 内标溶液的配制：先取少许甲醇加入100 mL容量中， 置于分析天平上，去皮归零，量取24 mL丙酮于容量瓶中，称重，精确至0.001 g。用甲醇定容至刻度摇匀即制备成内标溶液。 混合标准工作溶液的配制：先取10 mL内标溶液加入50 mL容量瓶中，置于分析天平上，去皮归零，用移液管分别量取2.0 mL乙醇（约1.5 g）、3.5 mL二氯甲烷（约4.5 g）、2.5 mL乙腈（约2 g）、2.0 mL乙酸乙酯（约1.8 g）于容量瓶中并依次称重，精确至0.0001 g，然后用甲醇定容至刻度即为混合标准工作溶液。 * 试样溶液的配制：取10 mL内标溶液于50 mL容量瓶中，置于分析天平上，去皮归零，用移液管量取适量的试样溶液，称重，精确至0.0001 g，用甲醇定容至刻度即为试样溶液。实验课教师负责配制含不同组分和含量的试样溶液，配制后分发给各实验小组。 * 5.2 开机测定样品 安装色谱柱：打开色谱仪柱箱，安装色谱柱，适当旋紧两端固定螺丝