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学位论文独创性声明本人郑重声明:
学位论文独创性声明
本人郑重声明: 1、坚持以。求实、创新”的科学精神从事研究工作。
2、本论文是复个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成
果。
3,本论文中除引文外,所有实验、数据和有关材料均是真实的。
4、本论文中除引文和致谢的内容外,不包含其他人或其它机构已 经发表或撰写过的研究成果.
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学位论文使用授权声明
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拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌(VerficiUiumdahliae)的研究拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌
拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌(VerficiUiumdahliae)的研究
拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌
(Verticillium dahliae)的研究
摘要
本研究利用离体抑菌圈法从茄子病健植株根际_十壤筛选出对黄萎病原菌 (Vertic凇“m dahliae)抑菌效果明显的芽孢杆菌F53菌株,对该菌株进行发酵条件 优化试验,初步探讨其发酵液的稳定性、发酵液中抑菌活性物质的性质,对黄萎 病原菌的抑菌机理及温室人工接种黄萎病原菌的茄子幼苗盆栽试验,同时,通过 生理生化试验及16SrDNA序列分析对菌株进行鉴定。
在菌种筛选过程中,发现F53菌株具有较强的平板抑菌能力,固体培养条件 下能够分泌几丁质酶及13—1,3-葡聚糖酶。抑菌谱试验表明,该菌株抑菌范围较 广,能够对多种所用指示菌株产生较明显的抑制生长作用。
为了获得F53菌株的最佳发酵条件,通过碳、氮源正交试验及培养条件的优 化,得出最佳培养基配方为(%);蔗糖0.3,玉米淀粉0.3,蛋白胨1.0,豆饼 粉0.3,NaCl 0.5,FeS0。0.002,MgS0;0.04:最佳培养条件为:培养基起始pH 值7.0-8.0、250mL三角瓶装液量50mL、摇瓶速度150r/rain、接种量4%、温度 34。C,培养时间48h,这为该菌株的发酵罐放大试验提供了理论性依据。
发酵液稳定性试验结果表明,该菌株发酵液热、酸碱、蛋白酶及贮藏的稳定 性均较好,发酵液经100。C处理100min,在pH3.0-10.0的条件F放置48h,蛋 白酶K及胰蛋白酶处理一定时间,4C冰箱中保存6个月,其抑菌活性基本不变。 发酵液分别用10%~100%饱和度(NI丑)2S04盐析,(NH4)2S04饱和度为70% 时,所沉淀出来的粗蛋白对黄萎病原菌抑菌圈最大,发酵液未能够检测到几丁质
酶酶活,B一1,3-葡聚糖酶活性不需要诱导。 抑菌机理的研究表明,该菌株发酵液能够抑制黄萎病原菌的菌丝生长和孢子
萌发。温室人工接种黄萎病原菌的茄子幼苗盆栽试验表明,该菌株芽孢制成的菌
剂防治效果达到46.3-75.8%。
通过形态特征、平板培养特征、生理生化特征及16SrDNA序列分析等对F53 菌株进行鉴定,初步将其归为类芽孢杆菌属(Paenibacillus)。 关键词t芽孢杆菌,茄子黄萎病,生物防治
拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌(Verticillium
拮抗性芽孢杆菌F53抑制茄子黄萎病菌(Verticillium dahliae)的研究
Study on Antagonistic Bacillus F53 Inhibiting VerticiUium Dahliae
Abstract
In this paper,a strain of Bacillus sp。(F53)was obtained from eggplant rhizosphere by assessing the inhibition zone in vitro,which has proved strong inhibiting activity antagonistic to pathogen Verticillium dahliae.Our work involved with optimizing fermentation,studying the stability of fermentation liquor and the property of the active substrate from fermentation liquor,probing the inhibiting mechanism,c
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