白地霉lip42脂肪酶的纯化及酶学性质-应用与环境生物学报.PDF

2010 16 5 ): 710~713 2010-10-25 应用与环境生物学报 ， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2010.00710 * 白地霉（lip42 ）脂肪酶的纯化及酶学性质 1 1 1 1 1 1, 2** 吴 尧 万 霞 张银波 黄凤洪 陈 洪 江木兰 1 （中国农业科学院油料作物研究所 武汉 430062） 2 （农业部油料作物生物学重点实验室 武汉 430062） 摘 要 白地霉（Geotrichum candidum）经过发酵培养，以发酵液为lip42脂肪酶粗酶液，经硫酸铵分级沉淀、透析脱 盐、DEAE纤维素柱层析及 Sephadex-75凝胶柱层析纯化处理，脂肪酶比活力达到 121.68 U/mg，纯化倍数为粗酶液的7.3 3 倍，回收率为30.25%% ，经SDS电泳显示为单一条带，相对分子质量约64 ×10 . 脂肪酶的酶学性质研究结果表明： 在40 ℃以下温度保存1 h内酶活性相对稳定；在pH 8.0和30 ℃反应条件下表现相对高的酶活性；在Mg2+存在情况下酶 活性提高10%%左右，而其它离子如Cu2+ 、Zn2+等以及0.1%的�ween 80、�ween 20及�riton-100对酶活性却有不同程度的抑 制作用，1 mmol/L的SDS和ED�A-Na 对酶活性的影响很微小. 图7 表2 参 15 2 关键词 白地霉 lip42；脂肪酶；酶活性；纯化；酶学性质 CLC Q939.9 : Q556 Purification and Properties of a Lipase from Geotrichum candidum lip42* 1 1 1 1 1 1, 2** WU Yao , WAN Xia , ZHANG Yingbo , HUANG Fenghong , CHEN Hong JIANG Mulan 1 ( Oil Crops Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 43