姜黄中姜黄素类组效关系研究-制药工程专业论文.docxVIP

摘 要 姜黄是姜科植物姜黄 Curcuma longa L.的干燥根茎，被广泛用于食品调料、 着色剂以及中药，药理研究表明具有抗肿瘤、消炎、抗氧化、抗艾滋病、抗老年 痴呆、降血脂等作用。主要药效成分为姜黄素类化合物，本文以姜黄中姜黄素类 化 合 物 为 研 究 对 象 ， 建 立 定 性 定 量 分 析 姜 黄 中 姜 黄 素 类 提 取 物 的 HPLC-ESI-MS/MS 方法；MTT 法检测姜黄素类提取物的抗肿瘤活性；正交偏最 小二乘法（OPLS）和典型相关性分析（CCA）辨识分析具有显著抗肿瘤活性的 成分；建立多个组效关系数学模型并进行模型评价，筛选出最佳组效关系模型。 主要研究工作如下： 1. 为了更加全面的研究姜黄中姜黄素类化合物，利用高效液相色谱-电喷雾 多级串联质谱(HPLC-ESI-MSn)技术，以 Venusil XBP C18 (2.1×150mm, 5um, Agela Technologies)作为分离色谱柱，乙腈和水为流动相，电喷雾离子源（ESI）， 正负离子同时扫描。根据谱峰的保留时间和质谱一、二级离子碎片信息，结合对 照品及参考文献信息，同时检测出姜黄中 28 种姜黄素类化合物，其中有 8 种尚 未见相关文献报道，并解析了这 8 种化合物的二级质谱断裂规律。 2. 运用内标法，对 31 批次姜黄中姜黄素类提取物进行了定量研究，每批次 均标记了 26 个符合定量标准的色谱峰，结果显示不同批次同等生药量的组成成 分差异很大；MTT 法评价 31 批次姜黄素类提取物的抗肿瘤活性，结果显示不同 批次同等生药量的提取物对宫颈癌 HeLa 细胞的抑制作用差异很大，最高抑制率 可达 85.5%，最低的只有 6.7%。 3. 应用 OPLS 方法辨识具有显著抗肿瘤活性的姜黄素类化合物，从已定量的 26 种化合物中筛选了 13 种，与 CCA 辨识分析的结果完全一致，结果显示具有 多个双键结构及多个羟基的姜黄素类化合物具有较强的抗肿瘤活性；同时，分别 应用两种支持向量机函数（ε-SVR，ν-SVR）、3 种核函数（径向基核函数（rbf）， 线性函数（linear function），多项式核函数（polynomial function））、3 种优化方 法粒子群算法（pso），遗传算法（ga），网格算法（grid search）），建立了 18 种 姜黄素类化合物的 组效关系模型，根 据有关参数筛选出 最优模型为 ε-SVR-rbf-pso，并对其做了相关评价。 关键词： 姜黄，姜黄素类化合物，HPLC-ESI-MS/MS, 抗肿瘤活性，相关性分 析，模型评价 ABSTRACT Turmeric is dry roots of Curcuma longa L. which belonged to zingiberaceae. It is widely used as food sauce, medicine and colorant. Pharmacological research shows that it has various functions such as antitumor, antiphlogistic, oxidation resistance, fighting AIDS, resistance to dementia, fall hematic fat and so on. Its efficacy mainly comes from Curcuminoids. This essay illustrated the antitumor function of Curcuminoids extracted from turmeric. HPLC-ESI-MS/MS method was developed for Curcuminoids qualitative and quantitative analysis; the antitumor activity of objective compounds were detected using an MTT analysis; Orthogonal partial least squares (OPLS) and canonical correlation analysis (CCA) were used to screen components with marked anticancer activity; eighteen component-activity relationship models were constructed and the best model was evaluated. The main r