高中生物选修三提纲(浙教版).docVIP

b b 基因工程 基因工程（生物技术）是狭义的遗传工程。核心是构建重组DNA分子，故也称重组DNA技术。 工具酶的发现和基因工程的诞生 理论基础：1.DNA是生物遗传物质的发现。2.DNA双螺旋结构的确立。3.遗传信息传递方式 的认定。 限制性核酸内切酶：能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 DNA连接酶? 质粒（载体）：具有自我复制能力的双链环状DNA分子，在细菌之中独立于拟核之外。常用大肠杆菌质粒，这种质粒常含有抗生素抗性基因（作为标记基因）。 除质粒外载体还有噬菌体、植物病毒和动物病毒（均为DNA病毒） 基因工程的原理和技术 基本原理：让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞在稳定和高效地表达。 基本操作步骤： 获取目的基因。 目的基因的序列已知：1.化学方法合成。2.逆转录法（以m-RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成）。3.用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因。 目的基因的序列未知：从基因文库（包括DNA分子的所有基因）中获取 形成重组DNA分子 用相同的限制酶切割目的基因和载体DNA 将重组DNA分子导入受体细胞 常用的转化方法：? 导入植物细胞：农杆菌转化法（农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。原理：Ti质粒上的t-DNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上），其次还有?基因枪法和?花粉管通道法等。? 导入动物细胞：显微注射技术。此方法的受体细胞多是?受精卵。? 导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是?繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少?，最常用的原核细胞是?大肠杆菌?，其转化方法是：先用氯化钙处理细胞，使其成为??感受态细胞?，再将?重组表达载体DNA分子?溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 筛选含有目的基因的受体细胞 依据：标记基因（或目的基因）是否表达 目的基因的表达 目的基因是否插入：DNA分子杂交，看是否出现杂交带 目的基因是否转录出了m-RNA：核酸分子杂交 目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交 个体生物学水平的鉴定：抗虫、抗病接种实验 基因工程的应用 基因工程与遗传育种（农牧业） 转基因植物：解决传统育种方法所需时间较长，且远缘亲本难以杂交的问题。 转基因动物 基因工程与疾病治疗（医药工业和医学领域） 基因工程药物： 胰岛素（注射）：蛋白质激素，治疗胰岛素依赖型糖尿病。传统：从猪羊的胰腺中提取。现：转入了人胰岛素原基因的大肠杆菌，可以合成人胰岛素原，加工后得到有生物活性的胰岛素 干扰素（注射）：病毒侵入细胞后产生的糖蛋白。有抗病毒、抗细胞分裂和免疫调节功能。传统：从人血液中提取。现：人白细胞干扰素基因获得克隆和表达。 乙型肝炎疫苗：蛋白质。现还无特效药物治疗乙肝。现：酵母乙肝疫苗（酵母菌），哺 乳动物细胞乙肝疫苗。 基因治疗：向目标细胞中引入正常功能基因，以纠正或补偿基因的缺陷。 首例：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者有缺陷的，经过转化、培养后可产生ADA，将成千 上万个转基因的T淋巴细胞转移到患者骨髓组织中。 技术还不成熟 基因工程与生态环境保护（环境保护领域）：工程菌 植物的克隆 技术基础：植物组织培养 植物细胞全能性和组织培养方法 植物细胞全能性（有全套基因）：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具 有发育成完整植株的潜能。（一些品系的培养细胞所诱导出的再生植株，在多次继代培养 后，会丧失细胞全能性的表达能力） 全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 植物组织培养程序 条件：离体（基因的选择性表达）、营养剂、生长调节剂、无菌、半固体培养基（含0.7-1%琼脂） 愈伤组织：一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织，在创伤的刺激下脱分化在创伤表面形成的。通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比，可诱导出芽和根的顶端分生组织，再得植株。 胚性细胞：将含愈伤组织培养物的试管放在摇床上，通过液体悬浮培养分散成的单细胞。细胞质丰富、液泡小、细胞核大。可发育成胚状体，再得植株。 用原生质体培养也可得新植株 植物细胞全能性的体现 在长期培养中，培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因： 染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等，且结果不可逆。 细胞或组织中激素平衡被打破或细胞对外源生长物质的敏感性发生改变 产生了缺乏成胚性的细胞系 细胞培养和器官培养 细胞培养：单细胞—细胞团—球形胚—心形胚—胚状体—完整植株 器官培养：有的植物可以在愈伤组织的基础上直接发育出花器官（调节激素比） 可在试管中进行植物受精过程和自受精卵进行的植物胚