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原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独
原创性声明
本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完 全意识到本声明的法律责任由本人承担。
论文作者签名: 圭丕丝 日期: 鲨i亟篁旦佃
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论文作者签名: 壹也一导师签名:溅日 期:竺蔓蛐
山东大学硕士学位论文降钙素、整合素B。亚基在围植入期
山东大学硕士学位论文
降钙素、整合素B。亚基在围植入期 小鼠子宫内膜中的表达
研究生卢桂兰
导师 武玉玲 教授
中文摘要
目的:
胚泡植入是一个复杂的生理过程,涉及胚泡与子宫内膜之I可一系列复杂的 相互作用。植入始于游离胚泡与子宫内膜上皮细胞的识别、进而定位、粘附,随 后胚泡的滋养层细胞穿透子宫内膜表面埋入基质。植入过程受众多因素的调节, 雌、孕激素、细胞因子、细胞粘附分子、细胞外基质等构成了一个严密的调控网 络。网络中的各个因素相互协调、相互制约,共同对植入进行调控。
尽管我们对胚泡植入调控机制方面的研究已经取得了很多进展,但仍有许 多问题亟待深入地探讨和研究。比如诱导子宫内膜进入接受态的信号分子是来自 母体,还是来自胚胎.或是两者共同作用:这些信号分子之间的关系如何?等 等
降钙素(Calcitonin,CT)是含有32个氨基酸残基的肽类激素,主要由甲 状腺滤泡旁细胞(C细胞)合成、分泌。最近的研究表明:子宫也合成降钙素。 整合素是一类普遍存在于细胞表面的跨膜糖蛋白,属于细胞粘附分子。近年来研 究表明,降钙素、整合素B 3亚基在胚泡植入及胚胎生长发育过程中具有重要作 用,可作为子宫内膜接受性的标志。为了进一步弄清子宫内膜中降钙素、整合素 B 3亚基与胚泡植入的关系并寻求上述问题的答案,我们建立了真孕和假孕两种 实验动物模型,运用免疫组织化学方法分别检测了正常未孕小鼠、真孕及假孕小 鼠子宫内膜中降钙素、整合素13 3亚基的分布及其变化并应用图像分析方法进行 了定量分析,旨在进一步研究降钙素、整合素B 3亚基在胚泡植入过程中的变化
山东大学硕士学位论文规律,从而探讨其与胚泡植入的相关关系,丰富生殖生物学中相关领域的知识,
山东大学硕士学位论文
规律,从而探讨其与胚泡植入的相关关系,丰富生殖生物学中相关领域的知识, 为进一步揭示植入的机制,提高体外受精一胚胎移植(IVF.ET)等辅助生殖技 术的成功率以及研究和开发新型避孕药物提供可靠的理论依据和动物模型。 研究方法:
取健康育龄期雌性小鼠,随机分13组,每组5只。将雌鼠分别与同种正常 雄性小鼠和绝育结扎雄性小鼠2:1于傍晚6.7时合笼,次日清晨检查阴栓。有 阴栓者定为真孕或假孕第一天。真孕、假孕组分别于合笼后第3、4、5、6、7、8 天脱臼处死,剖腹取子宫。用同样方法取正常未孕动情期雌性小鼠子宫作为对照 组。所得标本用4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,做厚度为69m的连续切片。 采用SABC免疫组织化学方法检测降钙素、整合素B 3亚基在围植入期小鼠子宫 内膜中的分布和变化情况,并应用图像分析法进行定量分析。
结果:
1.降钙素染色结果: 降钙素阳性着色部位仅位于子宫内膜腺上皮。
11未孕组:子宫内膜腺上皮呈弱阳性着色(±)。
2)真孕组:孕3天子宫内膜腺上皮呈弱阳性着色(±),孕4、5天呈阳性 着色(+);孕5天以后,降钙素在子宫内膜腺上皮中的表达明显上升, 到孕7天时达到峰值,呈强阳性着色(++);随后,降钙素在子宫内膜腺 上皮中的表达骤然降低,孕8天时,子宫内膜腺上皮阳性着色程度明显 减弱。孕6-8天胚胎中,降钙素呈阴性着色。
3)假孕组:假孕3、4天腺上皮呈弱阳性着色(±),假孕5天着色程度进
一步降低、至假孕6、7、8天,子宫内膜腺上皮中降钙素呈阴性着色。 2.整合素B 3亚基染色结果:
1)未孕组:整合素13 3亚基在未孕动情组子宫内膜中呈阴性着色。
2)真孕组:整合素B 3亚基阳性着色部位仅位于子宫内膜腺上皮细胞膜, 孕3天腺上皮仍呈阴性着色,孕4天时,整合素B 3亚基表达水平显著 上升,呈阳性着色(+),孕5天时达到高峰,呈强阳性着色(++)。之 后,整合素0 3亚基表达骤减,孕6天呈弱阳性着色(±)。孕6天胚胎 中整合素1
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