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课件:肿瘤基因治疗的基本策略和常用方法.ppt
病毒载体在基因治疗领域的应用最为广泛,大约70%的治疗方案采用了病毒载体,包括各种逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒、疱疹病毒、痘病毒等。这些 病毒载体有各自的特点,同时也存在各自的局限性。此外,还必须深入研究逆转录病毒诱发癌症的机理,构建更为安全的载体。基于同源重组和基因定点纠错原理,在DNA 水平的原位修复(靶向性)是遗传性疾病基因治疗的理想措施。与基因治疗载体系统相比,治疗基因表达调控的研究和进展相对滞后,主要受制于载体的包装容量。随着人类基因组计划的进展与完成,新的基因座控制区、隔离子、内含子、特异的启动子、增强子等的发现与分离,必定带动基因治疗向前发展。 肿瘤基因治疗的基本策略和常用方法 一.肿瘤和基因治疗的基本概念 二.采用基因治疗肿瘤的基本策略 三.常采用的基因治疗方法 四.对未来肿瘤基因治疗的展望 The maker: 一.肿瘤和基因治疗的基本概念 1.肿瘤(Tumor) 机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。 2.基因治疗 指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中,使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说,基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。 3.什么是肿瘤基因治疗 基因治疗的经典概念指通过外源基因导人人体以纠正内在的基因缺陷的疗法。肿瘤基因治疗不再局限于“纠正基因缺陷”,系指将外源的正常基因导人人体,达到直接或间接抑制或杀伤肿瘤细胞的目的。基因是生命之本,是生物得以保持其连续性和稳定性的物质基础。随着对恶性肿瘤发生发展分子机制研究的不断深人,出于对肿瘤是一种基因病的认识,加之恶性肿瘤的发病率和病死率较高,这使得恶性肿瘤的基因治疗成为近年来基因治疗研究的主要内容和热点。 4.与基因治疗有关几个概念 a.基因毒癌发生发展的第一步是活化致癌物,改变细胞内的DNA,导致原癌基因的移位及扩增,这些特殊基因的翻译,使带有这些异常基因细胞的某些特性得以专一表达,一个特殊的化学物对一系列细胞有诱变及DNA修复作用者,称为基因毒。目前人类已知的致癌物均为基因毒。 b.原癌基因(前癌基因)细胞癌基因存在于细胞基因组内,激活前的细胞癌基因称为原癌基因(前癌基因),一旦原癌基因激活成癌基因便会引起细胞癌变,癌基因激活后,通过其表达产物改变细胞生长和分化规律,诱发细胞癌变。细胞癌基因被激活的途径很多,如启动子插人,基因重排和扩增,基因点突变和DNA分子中去甲基化等。 c.抑癌基因正常细胞中存在抑制肿瘤发生的基因,称为抑癌基因。抑癌基因的存在从最初的一个发现中得到证实,即一个肿瘤细胞和一个正常细胞融合成的杂交细胞,往往不具有细胞表型,即使两种不同的肿瘤细胞杂交,也可能是非肿瘤性的,只有正常的亲代失去某些基因之后,其子代才会发生肿瘤。后来,通过限制性内切酶片段长度多态分析及分子克隆技术的研究证实,正常细胞中有一类对细胞增殖起负性调节作用的基因,如大肠癌中的p53基因,视网膜母细胞瘤和骨肉瘤中的Rb基因。这两种基因也是目前被确认并研究最为深人的抑癌基因。如将正常的Rb基因转人骨肉瘤细胞,Rb基因表达增高,细胞分裂几乎完全抑制,将Rb基因转人前列腺细胞,对正常细胞的生长无影响,但抑制了细胞的癌变,所 以当这一类的抑癌基因发生丢失,失活或变异时,就会促进细胞恶变。 二.采用基因治疗肿瘤的基本策略 ?目前国内外恶性肿瘤基因治疗基本策略包括: 1.免疫性基因治疗 2.病因性基因治疗 3.溶瘤腺病毒基因治疗 4.自杀基因治疗等 1.免疫性基因治疗 ?a. 免疫性基因治疗的对象 : 在肿瘤发生发展过程中,免疫系统发育未完善(3-4岁)和免疫机能衰退(老年人的细胞免疫和体液免疫功能均衰退)而出现两个肿瘤发生的年龄高峰期。 胸腺发育不良(Digeoge’s)综合症或咽囊综合症是因胸腺发育不良而导致细胞免疫系统停留在未分化阶段,这类患儿兼有细胞免疫缺陷和体液免疫缺陷的共济失调,恶性肿瘤的发生率高达10%。 由此说明细胞免疫和体液免疫功能的正常或活性增强在抗恶性肿瘤的发生中是不可缺少的。 选择性IgA缺乏:患者血浆中IgA极低,而IgG、I
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