课件：DNA的损伤、修复和基因突变.ppt

* 切除修复与癌症发生有关 着色性干皮病患者对日光或紫外线特别敏感，易患皮肤癌，分析发现患者皮肤细胞中缺乏核苷酸切除修复有关酶系统，对紫外线引起的DNA损伤不能修复。说明切除修复系统障碍是癌症发生的原因之一。 【在已研究过的真核生物中都很相似，说明其在进化中高度保守】 重组修复【 属于先复制后修复】 是细胞对在复制起始时尚未修复的损伤部位可先复制再修复的一种方式。即先跳过损伤部位，在新合成链中留下一个对应于损伤序列的缺口，该缺口由DNA重组来修复。先从同源DNA母链上将相应nt片段移至子链缺口处，然后再用新合成的序列补上母链空缺。 大肠杆菌的rec 基因编码主要的重组修复系统，它的一个主要作用是重新启动停滞的复制叉。 例如：嘧啶二聚体，烷化剂引起交联和其他损伤可进行复制后修复。复制时因酶在损伤位不能通过配对合成子链，可先跳过损伤位，在下一个冈崎片段起始或前导链上再复制，结果造成子链损伤相应位置留下缺口，此缺口由重组来修复。 * 重组修复中原损伤链并未除去。第二轮复制时，损伤部位缺口可通过重组弥补，直至损伤被切除修复消除。不断复制若干代，即使损伤始终未从亲链除去，在后代细胞群中也已被稀释，基本消除了损伤影响。 * 直接修复 (direct repair)【修复嘧啶二聚体或甲基化DNA】 将被损伤碱基回复到原来状态的一种修复。 例如：在DNA光解酶(photolyase)作用下，将在光下或经紫外线照射形成的环丁烷胸腺嘧啶二聚体及6-4光化物(6-4photoproduct)还原成为单体的过程。 直接修复的3种方式： ① 光复活 ② 06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)直接修复 【O6-甲基鸟嘌呤是被烷基化了的碱基，它已改变碱基配对性质。在MGMT作用下，将甲基转移到酶自身半胱氨酸残基上，从而得以修复。甲基转移酶由此而失活，但成为其自身基因和另一些修复酶基因转录的活化物，促进表达。因此MGMT能防止DNA链烷基化导致的死亡和突变效应】 ③ 单链断裂修复 应急SOS反应 (SOS response) 应急SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。 许多造成DNA损伤、抑制复制的过程能引起一系列复杂诱导效应，称SOS反应. 包括：诱导DNA损伤的修复、诱变效应、细胞分裂的抑制、溶原性细菌释放噬菌体，细胞癌变等与SOS反应有关。 Weigle效应 20世纪50年代，Weigle发现用 UV照射的λ噬菌体感染事先经低剂量UV照射的E.coli，存活噬菌体数增加，出现多突变型,而未经照射的细菌存活和变异率都较低，证明经UV照射后诱导产生了这些效应。 * SOS诱导的修复系统包括两类： 避免差错的修复 SOS中的错配修复、直接修复、切除修复和重组修复都能识别损伤部位或错配碱基而消除，这些修复不引入错误碱基。SOS能诱导切除和重组修复中某些关键酶和蛋白产生，使之在胞内含量升高，加强切除和重组修复能力。 易产生差错修复 SOS诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，使之在损伤部位即使出现不配对碱基，复制也能继续进行，以保证细胞存活。 * SOS反应由RecA蛋白和LexA阻遏物互作引起。RecA蛋白由E.coli rec基因编码，是在同源重组中起重要作用的蛋白，也是SOS的启动因子。 有单链DNA和ATP存在时，Rec A蛋白被激活，促进Lex A自体蛋白水解酶活性。水解使许多与修复有关基因被激活而表达。 包括：UV损伤修复基因uvr A、B、O、rec A 和lex A 基因，编码SSB的基因ssb,与λ噬菌体DNA整合有关基因him A等等。 RecA是SOS初发动因子，功能相当于去阻遏物。RecA被激活后促进LexA自身的蛋白水解活性，LexA是许多基因的阻遏物。 ①紫外线激发了RecA辅蛋白酶活性； ②有活性的RecA辅蛋白酶激活了结合在umuDC操纵子上的LexA蛋白 使LexA蛋白自体水解； ③水解后的LexA蛋白从umuDC操纵子上释放下来； ④umuDC操纵子开放，合成UmuD和UmuC蛋白； ⑤两者组成Umu D′2C复合体，引发DNA修复的易错旁路。 * SOS反应其生理意义：DNA复制受阻时，避免因细胞 分裂而产生不含DNA的细胞，或使细胞有更多进行重 组和修复的机会。 SOS反应能诱导切除修复和重组修复中关键酶和蛋白 产生，使这些酶和蛋白在细胞内含量升高，加强切除和 重组修复能力。 SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶， 使之在DNA链的损伤部位即使出现不配对碱基，复制 也能继续，保证细胞的存活。 * SOS反应包括两方面内容： ①DNA的修复； ②导致变异； 一方面，突变对细胞不利，但在受损伤