发酵液预处理.ppt

第三章 发酵液预处理 从微生物发液中提取发酵产品的第一步骤就是预处理，其目的的不仅在于分离菌体和其他悬浮液的性质，以利用于提取和精制后断各工序的顺利进行。各种发酵产品，由于菌种不同和发酵液特性不同，其预处理方法的选择也有所不同。大多数发酵产物存在于发酵液中，也有少数产物存在于菌体中，或发酵液和菌体中都有含有。 对于胞外产物，经预处理应尽可能使目的产物转移到液相，然后经固液分离除去固相； 对于胞内产物，则首先收集菌体或细胞，经细胞破碎后，目的产物进入液相，随后再将细胞碎片分离。 微生物发酵液的特性可归纳为： 发酵产物浓度较低，大多为1%～10%，悬浮液中大部分是水； 悬浮物颗粒小，相对密度与液相相差不大： 固体粒子可压缩性大； 液相粘度大，大多为非牛顿型流体； 性质不稳定，随时间变化，如易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水 解等作用的影响。 一、 降低液体粘度 降低液体粘度的常用方法有加水稀释法和加热法等。 采用加水稀释虽然降低液体粘度，但会增加悬浮液的体积，加大后继过程的处理任务。若加水一倍，则稀释后液体的粘度必须下降50%以上才能有效提高过滤速率。 升高温度可有效降低液体粘度，提高过滤速率，如12oBe 麦芽汁40℃时粘度为1.2×10-3Pa·s，升高到75℃其粘度可下降一半，过滤速率可加倍。同时，在适当温度和受热时间可使蛋白质凝聚，形成较大颗粒的凝聚物，进一步改善了发酵液的过滤特性。如链霉素发酵液，调酸至pH3.0后。加热至70℃，维持半小时，液相粘度下降至1/6，过滤速率可增大10~100倍。使用加热时必须严格控制加热温度与时间。 二、 调整pH pH值直接影响发酵液中某些物质有电离度和电荷性质，适当调节pH值可改善其过滤特性。 对于氨基酸、蛋白质等两性物质，在酸性条件下带正电荷，在碱性条件下带负电荷，而在某一pH值下，净电荷为零，称为等电点下，两性物质的溶解度最小，此即为等电点沉淀法提取谷氨酸。 对于蛋白质，由于羧基的电离度比氨基大，故蛋白质的酸性性质通常强于碱性，因而大多数蛋白质的等电点都在酸性范围内（pH4.0~5.5）。利用酸性来调节发酵液pH值使之达到等电点，可除去蛋白质等酸性两性物质。 在膜过滤中，发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附，通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质，即可减少堵和污染。此外，细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH值下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利用过滤的进行。 三、凝聚与絮凝 采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态，使其聚结合成较大的颗粒，便于提高过滤速率。除此之外，还能有效地除去蛋白质和固体杂质，提高滤液质量。因此。凝聚和絮凝是目前工业上最常用的预处理方法之一。 凝聚与絮凝的概念，过去常常混淆，现在趋于明确区分开来。凝聚是提在电解质作用下，由于胶粒之间双层电排斥作用降低，电位下降，而使胶体体系不稳定的现象。絮凝则是提在某些高分子絮凝剂存在下，基于桥架作用，使胶粒形成较大絮凝因的过程。 1 凝聚 凝聚作用：是向胶体悬浮液中加入某种电解质，在电解中异电离子作用，胶粒的双层电位降低，使胶体体系不稳定，胶体粒子间相互碰撞而产生凝集的现象。 双电层的形成------发酵液过滤难易程度。 电解质的凝聚能力。阳离子对带负电荷的发酵液胶体粒子凝聚能力的次充为： Al3+Fe3+H+Ca2+Mg2+K+Na+Li+。 2 絮凝 凝聚法形成的凝聚体----颗粒比较细小 絮凝法可形成粗大的絮凝体，使发酵液较易分离。 絮凝剂及其作用：絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物，其相对分子质量可高达数万至一千万以上，它们具有长链状结构，其链节上含有许多活性官能团，包括带电荷的阴离子（如-COOH）或阳离子（如-NH2）基团以及不带电荷的非离子型基团。它们通过静电引力、范德华引力或氢键的作用，强烈地吸收在胶粒表面。当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上，产生桥架联接时，就形成了较大的絮团，这就是絮凝作用。 工业上使用的絮凝剂又可分为如下三类： （1）有机高分子聚合物，如聚丙烯酰胺类衍生物，聚苯乙烯类衍生物。 （2）无机高分子聚合物，如聚合铝盐、聚合铁盐等。 （3）天然有机高分子絮凝剂，如聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖、脱乙酰壳多糖等。 絮凝效果与絮凝剂的加量、相对分子质量和类型、溶液的pH、搅拌转速和时间等因素有关。同时，在絮凝过程中，常需加