以亲和性吸附剂为主之材料进行对酵素之吸附探讨Theinvestigationof.PDF

以親和性吸附劑為主之材料進行對酵素之吸附探討 The investigation of affinity adsorbent-based material for the adsorption of enzyme 計畫編號： NSC 90-2214-E-006-026 執行期限：90 年 8月 1日至 91 年 7月 31日 主持人：許梅娟教授 國立成功大學化學工程學系 中文摘要 3) 高分子鏈有可扭曲的 結構並在和金屬離子 本研究是以幾丁聚醣 (chitosan) 為吸附劑之 錯合時可以彎曲成適當的構形。 單體基材，將 之應用於親和性吸附 ，並以吸附 基於其特性，因此於 本研究中即 針對 澱粉水解酵素之結果來探討吸附劑製備過程 á-amylase 之親和性吸附進行探討， 乃是 以 中可能影響吸附 效果之變因與改進 方法。研究 chitosan 為基材，並結合 IDA 為 ligand ，錯合 結果顯示以戊二醛為交聯劑搭配 IDA配位 銅離子後進行此親和性吸附劑對 á-amylase 之 基，並螯合銅離子製備之吸附劑有最佳的吸附 吸、脫附研究 ，以作為生產á-amylase 製程中 效果，可達 96 % 。但 在脫附階段以咪唑 分離純化之基礎。 (imidazole) 為脫附劑則是 以CNBr活化 法製備 2+ 2. 實驗方法 的 chitosan-IDA-Cu 可脫附出高達 98 %活性 之 á-amylase 。 2.1 澱粉水解酵素之活性測定方法 方法：利用碘溶液反應過程中藍顏色之減 關鍵詞 ：幾丁聚醣 、親和性吸附 、CNBr 活化 低程度來決定 amylase 之活性。 法 、咪唑 、戊二醛 、IDA 、澱粉水解 2+ 1) 基質：以pH=7.0 緩衝液配製 1 % 澱粉溶液 酵素 、chitosan-IDA-Cu 作為基質。 2)呈色劑：以去離子水配製 I /KI溶液後，取 Abstract 2 This research is aimed at the use of chitosan as 0.05 mL碘溶液加入 4.95 mL 去離子水製成 the supporting material of various adsorbents. 5 mL呈色劑。 Chitosan is mainly applied to the immobilized 3)酵素反應：取 5 mL澱粉溶液於試管中，置 metal affinity adsorption in this work. Best 入 37 恆溫振盪水浴中，加入 0.5 mL adsorption for a-amylase can only be found for á-amylase溶液反應 10 分鐘之後加入 5 mL cross-linked chitosan with Cu2+-chelated IDA 反應終止劑混合，取出 0.5 mL 加入 0.05 mL ligand. Imidazole is determined to be a good and 碘溶液